研究背景

禽支原体病是全球养鸡业的重大经济威胁，滑液支原体（Mycoplasma synoviae, MS）和鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum, MG）是主要致病菌，分别引发传染性滑膜炎和慢性呼吸道疾病，导致鸡群增重减缓、产蛋量下降，造成10%-20%的经济损失。传统灭活疫苗和减毒疫苗存在免疫持续期短、交叉保护有限、黏膜免疫诱导不足等问题，且支原体抗原变异及共感染进一步降低疫苗效果，亟需开发新型高效疫苗。

关键突破

成功构建三株重组疫苗菌株，稳定性与表达效率双优

研究团队以ΔphoPQ减毒鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella enterica serovar Typhimurium）为载体，分别构建了表达MS-GrpE的SG1、表达MG-CrmA的SG2，以及双抗原共表达的SFGs三株重组菌株。通过同源重组将抗原基因整合至沙门氏菌ompA启动子下游，经Westernblot验证，GrpE（30kDa）和CrmA（78kDa）蛋白均成功表达，且质粒在30代连续培养后仍稳定存在，为后续免疫效果奠定基础（图1）。

图1 重组质粒构建及疫苗菌株鉴定图

诱导强效体液-黏膜免疫，抗体水平显著优于传统疫苗

免疫SPF鸡后，SG1和SG2菌株表现出优异的免疫原性：SG1诱导的MS特异性血清IgG峰值OD值达1.66±0.03，SG2诱导的MG特异性IgG峰值达3.17±0.06；支气管肺泡灌洗液中黏膜IgAOD值分别为0.82±0.02和0.77±0.01，均显著高于灭活疫苗组和对照组（p<0.0001），双抗原菌株SFGs则呈现中度免疫反应，证明单抗原表达菌株在抗体诱导上更具优势（图2）。

图2 免疫后特异性IgG和IgA应答水平图

激活Th1型免疫与先天免疫，免疫信号通路全面激活

qRT-PCR检测显示，接种重组疫苗后，鸡脾脏中IFN-α、IL-1β、TNF-α等促炎细胞因子基因表达显著上调，其中SG1和SG2在攻毒后IFN-α表达量分别达8.3±0.35和8.1±0.35；同时，禽特异性TLR15和iNOS等先天免疫基因表达增强，表明疫苗激活了Th1偏向性免疫和先天免疫应答，为清除病原体提供了多重免疫保障（图3、图4）。

图3 细胞因子基因表达谱图

图4 先天免疫基因表达及生存曲线图

攻毒保护效果显著，病理损伤与细菌载量双降低

MS和MG攻毒实验表明，重组疫苗组鸡群存活率达90%-95%，显著高于感染对照组（70%-75%）；临床症状轻微，仅出现短暂打喷嚏等表现，而感染对照组出现严重关节肿胀、呼吸困难等症状。病理检查显示，疫苗组关节和气囊损伤轻微，气管与肺部细菌载量显著降低，且细菌排泄量大幅减少，证明疫苗能有效控制感染扩散（图5、图6）。

图5 攻毒后临床症状及病理损伤图

图6 体重增长、细菌清除及排泄量统计图

结论与展望

本研究成功开发了基于减毒沙门氏菌的新型禽支原体病疫苗，通过靶向MS-GrpE和MG-CrmA保守抗原，实现了体液免疫、黏膜免疫与先天免疫的协同激活，在保护率、免疫持续性和病原体清除能力上均优于传统灭活疫苗。该疫苗以ΔphoPQ菌株为载体，兼具安全性与稳定性，双抗原菌株为共感染防控提供了新思路。未来可进一步优化双抗原表达系统，解决抗原竞争问题；通过自然感染和共感染模型验证疫苗实际应用效果，并推进规模化生产工艺研发，为全球养鸡业提供更高效、广谱的支原体病防控工具。

参考文献

Sabir R, Liu M, Saeed HA, et al. Next-generation live vector vaccine targeting Mycoplasma synoviae and Mycoplasma gallisepticum via recombinant Salmonella. Vaccine 74 (2026) 128211.