新型烈性噬菌体vB_Sen-P10在牛奶和鸡肉中的应用评估
新型烈性噬菌体vB_Sen-P10在牛奶和鸡肉中的应用评估
肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis)是全球范围内引发食源性疾病的主要病原菌之一,尤其在禽肉、蛋制品及乳制品中具有较高的污染风险。随着抗生素滥用导致的耐药性问题日益严重,传统抗菌手段在食品安全领域的效果受到限制。因此,开发新型、安全、高效的生物防控策略成为当前研究的热点。噬菌体因其宿主特异性强、自我复制能力强、对真核细胞无毒性等优点,被认为是替代化学防腐剂和抗生素的理想候选者。
研究旨在从污水中分离一株新型烈性噬菌体,命名为vB_Sen-P10,系统评估其对肠炎沙门氏菌的裂解活性、宿主谱、生物学特性、基因组安全性及其在不同食品基质(如牛奶和鸡肉)中的应用效果,为其在食品工业中的生物防控应用提供科学依据。
噬菌体的分离与形态特征
研究成功从污水中分离并纯化出一株对肠炎沙门氏菌具有高效裂解活性的噬菌体,命名为vB_Sen-P10。透射电镜观察显示,该噬菌体具有典型的二十面体头部(直径约48.2 nm)和非收缩性长尾(长约81.0 nm),属于有尾噬菌体目(Caudoviricetes)下的Jerseyvirus属,为B1形态型。其在宿主菌平板上形成的噬菌斑清晰透明,直径为3.03 ± 0.08 mm,显示出典型的烈性噬菌体特征。
宿主谱与裂解活性
vB_Sen-P10对46株沙门氏菌中的23株具有裂解活性,涵盖肠炎、鼠伤寒、鸡伤寒、婴儿、汤普森、阿贡纳、肯塔基等多个血清型,甚至对部分大肠杆菌菌株也具有裂解能力,表现出广谱裂解特性,属于多价噬菌体。EOP分析进一步证实其在不同宿主菌株上的裂解效率差异,部分菌株EOP值高达0.5以上,显示出良好的应用潜力。
基因组特征与安全性评估
全基因组测序结果显示,vB_Sen-P10基因组为线性双链DNA,全长43,566 bp,GC含量为49.94%,共编码141个开放阅读框,其中55个具有已知功能,包括结构蛋白、复制相关蛋白和裂解相关蛋白(如内溶素)。基因组中未检测到任何与溶原性、毒力因子或抗生素抗性相关的基因,表明其具有良好的生物安全性,适用于食品和临床环境中的生物防控应用。
生物学特性与稳定性
vB_Sen-P10表现出优异的生物学特性:最佳感染复数为0.01,潜伏期仅为20分钟,裂解量高达298 PFU/细胞,吸附率达99%,吸附常数为6.41×10⁻⁹ mL/min。该噬菌体在广泛的环境条件下保持良好的稳定性,包括温度范围(37–80°C)、pH范围(3–12)、高盐浓度(5 M NaCl)、长期储存(360天)以及在模拟胃液和肠液中均能维持较高活性。此外,其对多种蛋白酶、消毒剂和表面活性剂也具有较强的耐受性,仅在CTAB、过氧乙酸和高浓度乙酸中表现出显著失活。
食品基质中的应用效果
在LB培养基中,vB_Sen-P10在不同MOI条件下均表现出显著的杀菌效果,MOI为1000时可在8 h内将宿主菌降至检测限以下,并在24 h内持续抑制其再生。在牛奶实验中,该噬菌体在4 °C条件下可在1 h内将低浓度(~10³ CFU/mL)的沙门氏菌完全清除;对高浓度(~10⁵ CFU/mL)污染,亦在24 h内实现完全清除。在鸡肉表面实验中,vB_Sen-P10同样表现出优异的抑菌能力,在初始污染水平为10³–10⁶ CFU/g的条件下,均能在1–4天内将沙门氏菌完全清除,且噬菌体本身在储存期间保持稳定。
研究系统表征了一株新型烈性噬菌体vB_Sen-P10,其具有广谱宿主范围、高效裂解能力、优异的环境稳定性和良好的基因组安全性。在牛奶和鸡肉等实际食品体系中,该噬菌体展现出显著的抑菌效果,具备作为生物防控剂替代化学防腐剂的潜力。未来可进一步探索其与其他噬菌体的协同作用、制剂开发及在实际生产环境中的应用效果,为控制食品中沙门氏菌污染提供新的解决方案。
参考文献:https://doi.org/10.1007/s11947-026-04265-6
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