核心提示：该研究系统地探究了新冠病毒受体结合域(RBD)「趋同演化」的机制，并前瞻性地对病毒未来突变演化方向进行了预测，为广谱疫苗和抗体药物的设计与研发提供了宝贵的理论与数据支持。

  自新冠病毒奥密克戎变异株出现以来，其子代变异株井喷式涌现，并呈现出「趋同演化」的趋势，大量中和抗体药物和康复者血浆已经「被逃逸」，这给新冠疫情的防控带来了十分严峻的考验。「趋同演化」现象的形成机制以及演化终点亟需深入探究。

  2022年12月19日，北京大学生物医学前沿创新中心(BIOPIC)、北京昌平实验室曹云龙副研究员/谢晓亮教授课题组联合中国食品药品检定研究院王佑春课题组，在国际顶尖学术期刊 Nature 在线发表了题为：Imprinted SARS-CoV-2 humoral immunity induces convergent Omicron RBD evolution 的研究论文。

  该研究系统地探究了新冠病毒受体结合域(RBD)「趋同演化」的机制，并前瞻性地对病毒未来突变演化方向进行了预测，为广谱疫苗和抗体药物的设计与研发提供了宝贵的理论与数据支持。

  该研究最早于2022年9月16日在线发布于预印本平台 bioRxiv，是世界首篇系统性研究新冠病毒「趋同演化」机制，预测病毒进化方向的研究论文，在国际学术界引起了广泛关注。

  研究团队对不同免疫背景人群中分离得到的抗体进行了大规模中和测定和逃逸图谱表征，发现病毒趋同进化产生的变异株几乎逃逸了目前所有中和抗体药物、疫苗接种者或康复者血浆，包括 BA.5 突破感染者血浆。并且，由于「免疫印迹」现象的存在，奥密克戎亚型变体突破感染后产生的抗体多样性逐渐降低，特别是 BA.5 突破感染，这提示基于 BA.5 变异株研发的疫苗加强针不能对新出现变异株产生良好的交叉防感染保护效果。

  另外，研究团队基于抗体的大规模中和测定和逃逸图谱表征的数据建立了一个计算模型，对病毒演化方向进行了合理预测。尽管这些新突变株，特别是其中的 XBB、BQ.1.1 和 CH.1.1 等支系具有前所未有的免疫逃逸能力，研究团队此前筛选出的广谱中和抗体药物组合SA55+SA58，特别是SA55，仍然强效中和所有主要突变株和未来短期内可能流行的突变株，且能同时具有治疗和预防作用，是目前唯一已知能够高效中和所有新突变株的、处于临床阶段的药物抗体，相关论文此前于12月初发表于Cell Reports 期刊。该抗体具有广谱中和能力强、将很难被未来变异株逃逸、半衰期长等特征，将特别适用于不适合接种疫苗的老年人、免疫缺陷人群等群体的防护。

  病毒的持续突变演化使得多种较高增长优势的变异株陆续涌现，BA.2.3.20、BA.2.75.2 及其支系，乃至最近出现的 BQ.1.1 和 XBB 等变异株相比于BA.5都具有更高的增长优势。尽管它们的进化过程各不相同，处于奥密克戎的不同支系，但其受体结合结构域(RBD)上的突变都集中于 R346、K356、K444、V445、G446、N450、L452、N460、F486、F490、R493 和 S494 等位点，呈现出「趋同演化」的趋势(图 1)。

  图 1：奥密克戎亚型变体 RBD 蛋白携带的突变

  中和测定的数据提示「趋同演化」产生的变异株具有极强的逃逸能力，绝大多数中和抗体药物都被以 XBB 为代表的变异株逃逸(图 2)，包括此前已初步进入国内市场的阿斯利康公司 Evusheld(「恩适得」)预防抗体药物。由于此类新突变株的流行，美国 FDA 也取消了礼来公司 Bebtelovimab(贝特洛韦单抗)的使用授权。唯一的例外是作者团队开发的 SA55 抗体，它是目前唯一对包括 XBB 和 BQ.1.1 等在内的所有突变株仍旧有效的进入临床阶段的抗体药物(图 3)。

  图 2：奥密克戎亚型对中和抗体药物的逃逸情况

  图 3：广谱中和抗体 SA55 和 SA58

  血浆中和数据也显示，XBB，CH.1.1 和 BQ.1.1.10(或 BQ.1.18)等毒株不仅逃逸了三针灭活疫苗接种者的血浆，也几乎完全逃逸奥密克戎 BA.1/BA.2/BA.5 突破感染者的血浆样本，显示出极大的免疫逃逸能力(图 4)。

  图 4：奥密克戎亚型逃逸疫苗接种者与康复者血浆中和

  为了探究不同奥密克戎变异株呈现「趋同演化」现象的具体机制，团队从 BA.1、BA.2 或 BA.5 突破感染康复者体内富集了抗原特异性记忆 B 细胞，发现其中大部分记忆 B 细胞交叉结合新冠原始株和奥密克戎变异株，印证了之前作者团队报道的存在于奥密克戎突破感染中的「免疫印迹」现象。基于高通量深度突变扫描技术，团队对不同来源的 3051 个交叉结合新冠原始株与奥密克戎变异株的抗体进行了突变逃逸图谱测定与聚类分析(图 5a)，发现奥密克戎特别是 BA.5 变体突破感染刺激产生的有效中和抗体种类明显减少，产生的主要是 E2.2、E3 和 F1 等不竞争 ACE2 结合表位且中和能力较弱的抗体(图 5b-d)。

  图 5：奥密克戎亚型变异株突破感染刺激产生抗体的表位表征

  基于抗体逃逸图谱、抗体中和活性、RBD 突变对于 ACE2 亲和力变化等数据，团队建立了一个模型，分别计算了 BA.2 和 BA.5 突破感染刺激产生抗体的突变逃逸图谱(图 6a)，结果显示，BA.5 突破感染刺激产生抗体的突变逃逸位点显著减少，表明其结合表位多样性明显减少。这提示，免疫印迹现象使得奥密克戎变异株突破感染刺激产生中和抗体表位多样性降低，导致免疫压力集中，从而加速了病毒的趋同进化。在此基础上，研究者基于 2022 年 8-9 月真实世界的主流免疫状态，基于计算模型预测了 BA.2.75 和 BA.5 的进化趋势(图 6b)，这在随后趋同进化产生的新毒株中得到验证。

  图 6：免疫印迹效应加速了抗体逃逸突变的趋同进化

  另外，研究人员基于 BA.2.75 和 BA.5 突变株的预测进化趋势，设计了携带不同 RBD 和 NTD 预测突变组合的假病毒(图 7a)，并测定了这些假病毒对不同中和抗体药物和血浆样本的中和情况及 ACE2 亲和力(图 7b-g)，结果显示，对 BA.5 或 BA.2.75 突变株最少引入 5 个突变就可以逃逸包括 BA.5 突破感染者在内的不同免疫状态下的几乎所有血浆样本。并且，合成的假病毒与之后真实世界流行的 BQ.1.1 支系、CH.1.1 支系等高度相似，验证了预测模型的准确性。

  图 7：趋同逃逸突变的累积能够几乎完全逃逸 BA.1/BA.2/BA.5 突破感染血浆的中和作用

  本研究揭示了「免疫印迹」造成的奥密克戎突破感染刺激产生抗体表位多样性降低，进而导致免疫压力集中化，促使新冠病毒 RBD 蛋白发生趋同演化的现象，这些积累趋同进化突变的病毒在获得极强突变逃逸能力的同时，也保持了较高 ACE2 亲和力。

  本研究中的预测方法为预测病毒突变演化趋势、开发广谱疫苗和抗体药物提供了参考资料，且具有扩展到其他体系的潜力。同时，研究结果也提示，基于 BA.5 突变株研发的疫苗对于其他变体的交叉保护效果很可能不够理想，进一步开发设计能够克服免疫印迹、激活广谱中和抗体的新型疫苗至关重要。而以 SA55+SA58 抗体组合为代表的广谱中和抗体既可以通过鼻喷给药方便快捷地在呼吸道建立短效预防，又可以通过注射实现感染初期的治疗和中长期预防，特别适用于保护高风险的医护人员以及不宜接种疫苗的免疫缺陷人群和老年人。

  初步的单盲随机对照试验显示，喷雾吸入一次提供的即时保护可维持 6~12 小时，预防感染效率可达到 80% 以上，且成本较低，方便使用。目前正在进行更严谨的临床试验，预计将来可以大规模使用。

  论文链接：https://www.nature.com/articles/s41586-022-05644-7