用于沙门氏菌超快速目视检测的单管分析
原创 发布时间:2023-05-31 浏览次数: 1954 来源: 翟慧潺

核心提示:沙门氏菌是引起食源性疾病的重要病原菌之一。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。


  沙门氏菌是引起食源性疾病的重要病原菌之一。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。当沙门氏球菌侵入人体后,人们可能会在12-72小时内出现腹泻、腹痛、呕吐、发烧,偶尔还会死亡。因此,做好对沙门氏菌的检测,防止“病从口入”还是非常重要的。

  什么是沙门氏菌?

  沙门氏菌是沙门氏菌病的病原体。属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。在水中不易繁殖,但可生存2-3周,冰箱中可生存3-4个月,在自然环境的粪便中可存活1-2个月。沙门氏菌很容易污染肉类、蛋类和乳制品等食品以及蔬菜和水果的表面。人们可能会在摄入受污染的食物后12-72小时内出现腹泻、腹痛、呕吐、发烧,偶尔还会死亡。因此,该菌的存在严重影响食品安全,对消费者健康构成威胁。因此,快速检测食品中的沙门氏菌对食品安全和人体健康至关重要。

  怎么检测沙门氏菌?

  迄今为止,培养法、酶联免疫吸附法、分子生物学检测等方法主要用于不同基质中食源性致病菌的检测。传统的基于培养的沙门氏菌检测方法耗时,通常需要2-5天。核酸聚合酶链式反应(PCR)的实时荧光扩增检测在病原体诊断中表现出优异的性能。然而,PCR需要1.5–2小时才能实现温度上升和冷却,这很难用于需要快速读取结果的现场检测场景。因此,建立一种灵敏快速的沙门氏菌检测方法显得尤为重要。


  在本文中,作者建立了一种本研究建立了基于CDE的单管AC-PCR方案。该方案集成了原位DNA提取,扩增,和可视化的超快速检测沙门氏菌。壳聚糖在pH = 5.0时带正电荷,可通过静电相互作用有效提取沙门氏菌DNA。为了简化提取步骤,本文的单管方案利用壳聚糖功能化DE的自沉淀特性,在3 min内实现无离心提取。


  图 1 检测原理图

  结论:本文的方案可以直接从生物样品中提取DNA,避免了大量的结合、洗涤、硅基柱洗脱等耗时的操作和试剂浪费。基于CDE的单管方案不仅克服了传统核酸提取方法的许多固有问题,而且将后续扩增方法的检出限降低了100倍。基于CDE的单管AC-PCR方案满足沙门氏菌检测的所有主要要求,包括无扩增干扰、核酸富集能力强、灵敏度高。该系统在人工感染样本的检测中也表现出了优异的性能,可以很容易、直观地区分阳性和阴性样本,该系统将为食源性病原体检测和福利点检测(POCT)提供新的线索。

  参考文献:Zhao X, Wan Q, Zhang J, Duan Y, Li Y, Ma J, Shi C, Ma C. Single-tube analysis for ultra-fast and visual detection of Salmonella. Anal Bioanal Chem. 2022 Mar;414(7):2333-2341. doi: 10.1007/s00216-022-03904-z. Epub 2022 Jan 25. PMID: 35079852; PMCID: PMC8788404.

网站声明

1、凡本网所有原始/编译文章及图片、图表的版权均属微生物安全与健康网所有,未经授权,禁止转载,如需转载,请联系取得授权后转载。

2、凡本网未注明"信息来源:(微生物安全与健康网)"的信息,均来源于网络,转载的目的在于传递更多的信息,仅供网友学习参考使用并不代表本网同具观点和对具真实性负责,著作权及版权归原作者所有,转載无意侵犯版权,如有侵权,请速来函告知,我们将尽快处理。

3、转载请注明:文章转载自www.mbiosh.com

※联系方式:020-87680942

在线留言
*公司名称:
*联系人:
*电话:
查询类别:
电邮地址:
地址:
问题:

直播视频

在线咨询

联系我们

回到顶部

我要留言