核心提示:LFA是一个简单的分析平台,其中使用到特异性的捕获抗体和识别抗体,显色物质、样品垫、NC膜、吸水纸等材料。其中抗体是LFA技术的核心,直接影响LFA的检测能力。
沙门氏菌是一种常见的革兰氏阴性细菌,可以通过水果和蔬菜传播途径引起食物中毒。2013年,美国农业部报告显示378人死于沙门氏菌感染,造成了大约35亿美元的损失。世界卫生组织宣布,沙门氏菌是全世界食源性疾病的主要原因,也是全球腹泻疾病的四个关键原因之一,每年有5.5亿人患上腹泻疾病。保持食物不含沙门氏菌是全球卫生组织的主要关注点之一,检测沙门氏菌是确保食品安全的重要一环。各种分析技术,包括电化学生物传感器、荧光传感、免疫层析试纸条(LFA)和PCR等已被开发并用于沙门氏菌检测。在这些方法中,LFA因其低成本、检测速度快和适合现场分析等优点被广泛应用。
LFA是一个简单的分析平台,其中使用到特异性的捕获抗体和识别抗体,显色物质、样品垫、NC膜、吸水纸等材料。其中抗体是LFA技术的核心,直接影响LFA的检测能力。但是抗体具有对pH值、温度和氧化还原反应敏感,需要耗时且昂贵的生产步骤,并表现出不同的批次活性等缺点。因此,寻找可以替代抗体的具有特异性识别的物质可以在很大成本上解决目前存在的问题。噬菌体是细菌特异性病毒,它对目标细菌具有高特异性,且对极端环境具有耐受性,可以通过简单的传代培养进行扩增以获得大量的噬菌体,克服了抗体所存在的缺陷,因此,噬菌体有望成为免疫层析试纸条检测中抗体的良好的替代品。
2021年,在一项研究中将在安卡拉周围湖泊中分离到的肠炎沙门氏菌噬菌体应用与免疫层析试纸条检测中,研究结果显示,噬菌体用于免疫层析试纸条时具有较好的检测能力,其具体的检测原理如图1所示,将噬菌体与20 nm胶体金通过共价结合偶联,同时,噬菌体作为T线喷涂在NC膜上,其检测效果如图2所示,可以检测到101-107 CFU/mL的肠炎沙门氏菌,并且在食品样品如鸡蛋和鸡肉中也具有良好的检测效果。
图 1噬菌体用于免疫层析试纸条的检测原理
图 2 噬菌体代替捕获抗体和识别抗体的检测效果
参考文献
[1] Ilhan H, Tayyarcan E K, Caglayan M G, et al. Replacement of antibodies with bacteriophages in lateral flow assay of Salmonella Enteritidis[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2021, 189: 113383.