核心提示：噬菌体裂解酶可降解肽聚糖层而杀死细菌。理论上，革兰氏阴性菌因其外膜保护肽聚糖层，对噬菌体裂解酶具有天然的抗性。但一些具有C端两亲螺旋的裂解酶，可以穿透原外膜屏障。将具有外膜通透性的肽与裂解酶融合改造，亦可杀死革兰阴性病原体。
噬菌体裂解酶可降解肽聚糖层而杀死细菌。理论上，革兰氏阴性菌因其外膜保护肽聚糖层，对噬菌体裂解酶具有天然的抗性。但一些具有C端两亲螺旋的裂解酶，可以穿透原外膜屏障。将具有外膜通透性的肽与裂解酶融合改造，亦可杀死革兰阴性病原体。在这项研究中，作者利用LysMK3与抗菌肽A融合，从而得到改造后的LysMK34 (eLysMK34)。改造后的裂解酶比改造前的裂解酶具有更高的抗菌活性。特别是黏菌素耐药菌株效果甚好，并且在补体失活的人血清中抗菌活性增强。
Cecropin A是一种最初在飞蛾(天蚕)中发现的抗菌肽，是一类由昆虫分泌的具有疏水性和阳离子性的两亲性多肽。这些肽的两亲性通过相互作用和破坏细菌外膜的疏水(由脂A部分介导)和离子(由与磷酸基团相互作用的二价阳离子介导)稳定力来促进革兰阴性菌的外膜通透性，可穿透细胞膜。作者将此抗菌肽与鲍曼不动杆菌噬菌体MK34的裂解酶LysMK34融合，构建的新型的复合裂解酶eLysMK34。
通过改造裂解酶，改造后的裂解酶eLysMK34具有以下几条优点：
1、可特异性抑制鲍曼不动杆菌的生长，但对P. aeruginosa和E. coli没有作用(表1);
2、eLysMK34比亲本裂解酶(LysMK34)具有更快的杀菌活性，30 min后，所有被试菌均降低到检测限以下(图2);
3、eLysMK34提高了对不同耐药谱鲍曼不动杆菌的抗菌活性，且其杀菌活性对细胞内渗透压和EDTA依赖性大幅度降低(图3);
4、eLysMK34对稳定期的细胞也具有较强的杀菌活性(图4);
5、eLysMK34对补体失活的人血清中的致病菌具有亚致死损伤作用(图5);
6、eLysMK34对人上皮细胞株HaCaT没有细胞毒性(图7);
总结：
综上所述，这些结果表明，将具有内在抗菌活性的裂解酶与选定的外膜通透肽融合是进一步提高此类裂解酶体外抗菌性能的有效策略。本研究表明，将外膜通透性肽融合到具有内在抗菌活性的裂解酶中，可获得具有更强抗菌活性的优良裂解酶，包括对最令人担忧的黏菌素耐药鲍曼不动杆菌菌株的抗菌活性。研究的结果为裂解酶的功能性改造及后续的有效治疗方案提供了理论支撑；对于细菌耐药性的解决方案，在裂解酶的基础上进行多功能化的改造是一种新的思路。
原文链接:https://doi.org/10.1128/AEM.01515-21
