核心提示：噬菌体编码的裂解酶是对抗鲍曼不动杆菌感染的替代品。一些裂解酶，如LysMK34，有一个C末端的两亲性螺旋，使它们能够穿透原本不透膜的外膜屏障。

  噬菌体裂解酶是对抗耐抗生素病原体的有前途的抗菌替代品。革兰氏阳性细菌通常被认为是外源添加裂解酶的容易目标，因为它们的细胞壁没有外膜保护。相比之下，革兰氏阴性细菌的噬菌体裂解酶受外膜等因素的制约，其研究和应用滞后于革兰氏阳性细菌噬菌体裂解酶。但是，近年来，研究人员通过物理、化学和基因工程等多种手段努力地克服外膜屏障的制约。

  噬菌体编码的裂解酶是对抗鲍曼不动杆菌感染的替代品。一些裂解酶，如LysMK34，有一个C末端的两亲性螺旋，使它们能够穿透原本不透膜的外膜屏障。另一种用裂解酶杀死革兰氏阴性病原体的方法依赖于将具有外膜通透性的多肽融合到赖氨酸上。在这项工作中，作者利用LysMK34的内在抗菌活性，通过三个Ala-Gly重复序列的连接物将天蚕素A融合到其N端，得到工程LysMK34(ELysMK34)。在MIC值(0.45~1.2 mm)、杀灭率和杀灭程度方面，工程裂解酶具有比亲本裂解酶LysMK34更好的抗菌活性。eLysMK34对静止期细胞的活性增加了2倍，杀菌效果变得不那么依赖于细胞内渗透压。特别是，粘菌素抗性菌株对eLysMK34高度敏感，在补体灭活的人血清中观察到增强的抗菌活性。这些观察表明，将具有内在抗菌活性的裂解酶与选定的外膜通透性多肽融合是进一步提高此类裂解酶体外抗菌性能的有用策略。

  图1. eLysMK34和粘菌素组合针对鲍曼不动杆菌 MK34 (A)、鲍曼不动杆菌 RUH134 (B)、鲍曼不动杆菌 Greek46 (C) 和鲍曼不动杆菌 Greek47 (D)的等效线图。

  图2. 当暴露于1 mM LysMK34(红条)或1 mM eLysMK34(蓝条)时，重新悬浮在缓冲液中，不同鲍曼不动杆菌MK34(A)、RUH134(B)、Greek46(C)和Greek47(D)的时间杀灭试验。

  图3. LysMK34(红色)和eLysMK34(蓝色)对高渗透压(20 mM HEPES-NaOH，pH 7.4;108 CFU/ml)下稳定期的鲍曼不动杆菌MK34(A)和鲍曼不动杆菌Greek47(B)的抗菌活性呈剂量依赖关系。

  图4. LysMK34(红色)和eLysMK34(蓝色)对重悬于100%补体灭活的人血清中的鲍曼不动杆菌MK34(A)、RUH134(B)、Greek46(C)和Greek47(D)的抗菌活性。

  参考文献

  Abdelkader, Karim et al. “Engineering a Lysin with Intrinsic Antibacterial Activity (LysMK34) by Cecropin A Fusion Enhances Its Antibacterial Properties against Acinetobacter baumannii.” Applied and environmental microbiology vol. 88,1 (2022): e0151521. doi:10.1128/AEM.01515-21