一、质量控制

  1.实验过程中,每批样品预增菌液、选择性增菌液、分离平板等都要做空白对照。如果空白对照平板上出现沙门菌可疑菌落时,应废弃本次实验结果,并对增菌液、吸管、平皿、培养基、实验环境等进行污染来源分析。

  2.定期使用鼠伤寒沙门菌ATCC14028菌种或相应定量活菌参考品,在P2实验室或阳性对照实验室内,用适当的食品样品进行阳性对照实验验证,染菌剂量应控制在10-100CFU/25g样品,并进行记录,此验证实验至少每2个月进行一次。

  3.每2个月将所使用的培养基和生化试剂用GB4789.28-2013推荐的阳性和阴性对照标准菌种进行验证,并进行记录。

  二、操作要点与注意事项

  1.使用均质袋进行预增菌培养时,应使用带有底托的均质袋架子,防止培养过程中预增液泄露污染培养箱。

  2.在进行TSI培养时,应将试管口松开,保持管内有充足的氧气,否则会产生过量的H2S。

  3.由于三糖铁琼脂试验中底部分解需要厌氧环境,琼脂底部与斜面最低点的距离应不少于4厘米。

  4.如果在培养22~24小时后,BS平板上未见沙门菌可疑菌落,应再培养22-24小时,如果仍没有可疑菌落,应挑取非典型菌落进行鉴定。

  5.在培养箱中,为防止中间平皿过热,高度不得超过6个平皿。

  6.本方法移液时可使用可连接吸管的电动移液器,在使用过程中,一旦液体进入电动移液器滤膜中、应立即对滤膜进行更换，以防止交叉污染。

  7.当对易产生较大颗粒的样品(如肉类)进行检测时、建议使用带滤网均质袋,以方使均质后用吸管吸取匀液。

  8.鉴于微量移波器移液头较短,为控制污染、在方法移液过程中不应使用。

  9.BS平板应制备后避光常温保存，并在24小时内使用。