尽管已经存在有效的疫苗和药物，乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)仍在全球范围内造成了重大的公共卫生负担。目前，已有7种药物被批准用于慢性乙型肝炎治疗，包括2种形式的干扰素(标准和聚乙二醇干扰素)和5个核苷(酸)类似物(拉米夫定、阿德福韦、替比夫定、恩替卡韦和替诺福韦)。虽然这些药物在一定程度上能够有效抑制HBV复制，但无法实现彻底治愈。

2021年11月，病毒学国家重点实验室/武汉大学基础医学院医学病毒学研究所夏宇尘教授研究组在美国胃肠病学会期刊《Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology》上发表题为“A Novel Mouse Model Harboring Hepatitis B Virus Covalently Closed Circular DNA”的研究论文。该研究建立了一种HBV持续复制的慢性肝炎模型，探索了cccDNA的形成途径，并且验证了cccDNA的染色质化和转录激活功能。

首先，研究人员构建了携带复制缺陷型HBV1.04基因组的腺相关病毒载体(AAV)，将其转染至Huh7细胞中导致HBeAg分泌，而未能检测到HBsAg和新产生的病毒粒子。但在病毒包装后分别感染HepG2和AML12细胞，发现该载体不仅能在细胞培养上清中检测到HBeAg、HBsAg和新产生的病毒粒子，还能在细胞核中检测到形成的cccDNA。随后，研究人员利用抗病毒药物-核衣壳抑制剂(BAY41-4109和GLS4)和RNA逆转录抑制剂恩替卡韦(ETV)处理细胞，发现该模型中形成的cccDNA不是由rcDNA修复而来，而是通过磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶蛋白(Ataxia-Telangiectasiaand Rad3-related protein, ATR)介导的DNA损伤修复反应完成的。紧接着，通过尾静脉给小鼠注射AAV-HBV1.04载体后发现小鼠血清中长期存在病毒抗原和病毒粒子，其肝细胞中也可以检测到cccDNA持续形成。这表明该系统在小鼠肝细胞中可以支持HBV cccDNA的形成。最后，研究人员使用抗病毒药物对该模型进行验证，结果显示ETV可明显抑制HBV DNA水平，且不影响血清中抗原和肝细胞中cccDNA水平，Poly(I:C)可显著抑制所有HBV标志物(如血清中抗原水平、肝细胞中的蛋白表达水平和HBV DNA水平)。

总之，该模型能够持续产生功能性cccDNA，因此它将为深入研究HBV cccDNA和开发新型抗病毒药物以实现功能性HBV治愈提供一个独特的平台。

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2021.105061