能够防控铜绿假单胞菌的小战士

2023-05-31 00:00:00
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核心提示:铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)原称绿脓杆菌。在自然界分布广泛,常存在于各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等,主要在潮湿的环境中。

  铜绿假单胞菌(P. aeruginosa)原称绿脓杆菌。在自然界分布广泛,常存在于各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等,主要在潮湿的环境中。铜绿假单胞菌是医院内感染的主要病原菌之一。目前可以采用噬菌体对该菌进行防控。


  噬菌体PN09从杭州的河流中分离出来,在透射电镜的扫描下观察到,噬菌体的头部长度为77.5±5.4nm,总长度为187.8±10.6nm,根据国际病毒分类委员会的分类系统,PN09被归入肌病毒科。


  噬菌体的潜伏时间为20 min,裂解期为100 min,裂解量为51 pfu/cell。


  噬菌体PN09在温度25-45 ℃条件下基本保持稳定,在pH3-11条件下基本保持稳定。


  BLAST分析表明,PN09基因组与假单胞菌噬菌体phiPsa315具有相似性,同一性为96.1%,覆盖率为91.0%。Gene89被预测为裂解酶,并命名为LysPN09。根据NCBI保守结构域数据库,LysPN09属于Muraidase超家族(Accession:cl13324)中的N-乙酰胞壁酰胺酶家族,可降解宿主细菌细胞周围的肽聚糖层。


  LysPN09成功表达纯化,在20.6 kDa处观察到明显的条带。


  在 LysPN65 浓度为50至400 μg/mL 时,这些浓度之间的裂解活性无显著差异(p > 0.05)。然而,当LysPN0浓度低于50 μg/mL时,裂解活性显著降低(p < 0.05)。


  裂解酶在温度25-40 ℃下保持稳定,在pH6-8的条件下基本保持稳定。


  裂解酶与EDTA的联合使用效果要比单独使用的效果要更加显著。

  结论:综上所述,噬菌体PN09可以裂解铜绿假单胞菌菌株,并且在不同的温度和pH条件下是稳定的。裂解酶LysPN09对铜绿假单胞菌株表现出高活性,与EDTA联合使用时可以有效地裂解菌株。因此,噬菌体PN09和LysPN09(它所含的内溶素)是控制铜绿假单胞菌的潜在候选者。这项研究的结果有助于探索噬菌体疗法的潜在用途。

  参考文献:

  Ni P, Wang L, Deng B, Jiu S, Ma C, Zhang C, Almeida A, Wang D, Xu W, Wang S. Characterization of a Lytic Bacteriophage against Pseudomonas syringae pv. actinidiae and Its Endolysin. Viruses. 2021 Apr 7;13(4):631. doi: 10.3390/v13040631. PMID: 33917076; PMCID: PMC8067700.

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