三糖铁琼脂(TSI)实验是鉴别区分大多数肠杆菌科的重要生化反应，让我们一起来了解三糖铁琼脂的实验反应原理及基本反应结果。

  1.三糖铁琼脂的配方及反应原理

  配方(每升)：蛋白胨 20g，牛肉膏粉 5g，乳糖 10g，蔗糖 10g，葡萄糖 1g，氯化钠 5g，硫酸亚铁铵 0.2g，硫代硫酸钠 0.2g，琼脂 12g，酚红 0.025g，最终pH 7.4±0.2

  原理：蛋白胨、牛肉膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与硫酸亚铁铵中的铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

  检验原理：将指控细菌新鲜培养物于培养基高层穿刺，斜面划线接种，36±1℃培养24～48小时观察结果。该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解产酸使斜面先变黄，但因量少，生产的少量酸，再接触空气而氧化，加之细菌生长利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故斜面后来又变红。底部由于厌氧状态，酸类不被氧化，仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌，则产生大量的酸，使整个培养基呈黄色。另外，因某些细菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应生成黑色的硫化亚铁沉淀。

  2.肠杆菌科各属再三糖铁琼脂内的反应结果

  注：+表示阳性;-表示阴性;+/-表示多数阳性，少数阴性