副溶血性弧菌的多重检测方案

2023-05-16 00:00:00
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核心提示:副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus, Vp)是在世界范围内引起人类肠胃炎的一种常见且重要的病原体,快速、灵敏、准确地对其进行检测和鉴别相当重要。

  副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus, Vp)是在世界范围内引起人类肠胃炎的一种常见且重要的病原体,快速、灵敏、准确地对其进行检测和鉴别相当重要。Deshun Xu等人根据Vp的管家基因groEL和两个毒力基因(tdh和trh)设计了三组引物-探针组,由此建立了一种多重荧光定量PCR方法。此法不仅可以有效地区分Vp强毒株和非毒株,还可以快速可靠地检测Vp毒株和非毒株的数目。

  副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus, Vp)是一种革兰氏阴性嗜盐菌,存在于所有盐碱环境中,是一种重要的人类病原体,感染后可引起急性胃肠炎。另外,Vp可在海产品间交叉传播,在许多国家是一个重要的公共卫生问题。因而,快速、特异、可靠地检测Vp对人类健康具有重要意义。然而,传统的基于病原分离培养-生化分析的Vp诊断思路,耗时较长(3天);且这种方法不能区分毒株和非毒株,因为这两者的生长表型没有明显可界定的差异。相较之下,近年来广泛应用的分子检测技术,如PCR,在Vp检测上已能获得认可度较高的快速且特异的结果:鉴定Vp的同时完成毒株(tdh/trh)和非毒株的鉴别。不过先前研究所利用的具有物种特异性的23S或16S rRNA基因作为Vp检测靶点,并不能很好地将Vp从其他弧菌中区分出来,如溶藻弧菌、哈氏弧菌等。

  因此,Deshun Xu等人建立了一种多重实时荧光定量PCR方法,根据Vp的管家基因groEL和两个毒力基因(tdh和trh)设计了三组引物-探针组,应用于致病性和非致病性Vp的定量检测。此多重方法对纯培养物和模拟样本的检测限分别为104和105 CFU/mL(或CFU/g),且检测结果能够(在样本富集后)3小时内给出。研究的创新性虽然不高,但其所建立的多重实时荧光定量PCR检测方法可以快速、特异、可靠地检测Vp的总数和致病性菌株数目,对控制Vp暴发性感染和保护人民身体健康具有重要意义。

  原文doi:10.1139/cjm-2018-0083

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