CRISPR/Cas9介导的SERS/比色双模侧流平台与智能手机相结合快速灵敏检测金黄色葡萄球菌

2024-04-18 19:36:22
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核心提示:本文开发了一种表面增强拉曼散射(SERS)和比色双模平台,称为智能手机集成CRISPR/Cas9介导的侧流条(SCCLFS),并将其应用于超灵敏的金黄色葡萄球菌(S. aureus)检测。

  近年来,随着创伤手术和器官移植的广泛使用,金黄色葡萄球菌引起的临床感染一直在增加。金黄色葡萄球菌感染的高发病率和死亡率使其成为全球感染相关死亡的主要原因。致病性细菌感染对全球公共卫生构成重大威胁,因此开发快速和可靠的检测方法变得十分紧迫。

  侧流条(LFS)是一种简单易用的纸质装置,可以用于病原体检测。近年来,基于CRISPR/Cas技术的LFS得到了发展,具有更高的灵敏度。然而,现有的方法缺乏定量能力。最近,将纳米材料应用于LFS,结合了色度法和表面增强拉曼散射(SERS)技术,提高了分析的韧性和定量能力。作者提出了一种智能手机集成CRISPR/Cas9介导的LFS(SCC-LFS),利用SERS和色度法双模平台进行病原体检测。

  本设计中,制备功能化的银包覆金纳星(AuNS@Ag)作为LFS检测的标记材料。在存在S. aureus的情况下,目标基因诱导的扩增产物可以被用户定义的CRISPR/Cas9系统准确识别和解旋,形成中间桥梁,将许多AuNS@Ag结合到测试线(T线)上。因此,T线被着色,并且使用智能手机集成的便携式拉曼光谱仪获得可以识别的SERS信号。这种设计不仅保持了视觉读出的简单性,而且集成了SERS的定量能力,使用户可以根据需要灵活选择检测模式。使用这种方法,可以通过比色和SERS两种模式检测到1 CFU/mL的S. aureus,这比大多数现有方法更好。通过结合快速提取过程,整个检测可以在45分钟内完成。该方法的健壮性和实用性在各种真实样品中得到了进一步证明,表明其对S. aureus可靠筛查具有相当大的潜力。

  原文doi:10.1016/j.bios.2024.116046

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