小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)是少数几种能在冷藏温度下(0-4℃)生长繁殖的肠道致病菌之一。1981年我国才发现此病，通过全国性调查和研究，发现其在我国的分布非常广泛。20 世纪80 年代中期我国发生过两次大的流行，不少地区因耶尔森氏菌引起胃肠炎和严重腹泻。鉴于小肠结肠炎耶尔森氏菌的危害性，很多国家都已将该菌列为食品的常规检测项目。

  什么是小肠结肠炎耶尔森氏菌？

  小肠结肠炎耶尔森氏菌为革兰氏阴性球孢杆菌，在世界范围内广泛分布于自然界中的水生和动物宿主中，猪是人类致病菌株的主要宿主，人类可通过摄入被污染的食物或水或输血直接被小肠结肠炎耶氏菌感染。小肠结肠炎耶尔森氏菌可导致一种称为耶尔森氏病的动物传染性疾病，感染的症状通常为肠系膜腺炎，急性腹泻，末端回肠炎和假性阑尾炎，甚至会导致败血症，尿路感染、关节炎和脑膜炎，该病尤其容易发生在在新生儿、老年人和免疫功能低下的患者中。

  怎么检测小肠结肠炎耶尔森氏菌？

  迄今为止，平板培养法、酶联免疫吸附法、分子生物学检测等方法主要用于不同基质中食源性致病菌的检测。这些方法不仅需要昂贵的仪器和高技能的工人，还涉及复杂的样品预处理和耗时，限制了它们在食品安全和保障中的应用。因此，建立一种简单、灵敏、特异的小肠结肠炎耶尔森氏菌定量检测方法显得尤为重要。

  在本研究中，使用两种分子平台(rtPCR和ddPCR)来评估病原体在实验污染的绿叶蔬菜中的行为，并评估在不同温度下孵育11天后的检出率。通过比较，两种技术方法之间出现了明显的差异:只有ddPCR能够在污染水平较低的绿叶蔬菜中检测出病原体。此外，本研究的结果强调了孵化时间和温度对蔬菜中小肠结肠炎耶尔森菌的存活和/或生长的重要性:在18和25◦C时，病原体的浓度在孵化过程中显著降低。根据数据，rtPCR的使用导致低估了蔬菜中致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌的真实流行率，而目前建议的小肠结肠炎耶尔森菌的温度和时间(25℃，24小时)允许优化检测。

  结论：结果表明，样品中小肠结肠炎耶尔森氏菌检出率随潜伏期的变化而变化，且受温度和时间的影响较大。实际上，目前提出的条件，这种病原体(25◦C 24小时)允许最高的检出率，但rtPCR被证明导致低估了病原体在蔬菜中的真实流行率。通过采用ddPCR技术可以有效地克服这一问题，这被证明是快速检测食品样品中病原体的一种更可靠的策略。

  参考文献：

  Cristiano D, Peruzy MF, Aponte M, Mancusi A, Proroga YTR, Capuano F, Murru N. Comparison of droplet digital PCR vs real-time PCR for Yersinia enterocolitica detection in vegetables. Int J Food Microbiol. 2021 Sep 16;354:109321. doi:10.1016/j.ijfoodmicro.2021.109321. Epub 2021 Jun 29. PMID: 34225034.