利用便携血糖仪检测食物中的致病菌

2022-10-13 00:00:00
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核心提示:金黄色葡萄球菌是最重要的食源性细菌致病菌之一,可引起多种疾病。而基于个人血糖仪(PGM)平台的敏感和高选择性的磁适体生物传感器,就能用于检测金黄色葡萄球菌。

  金黄色葡萄球菌是最重要的食源性细菌致病菌之一,可引起多种疾病。而基于个人血糖仪(PGM)平台的敏感和高选择性的磁适体生物传感器,就能用于检测金黄色葡萄球菌。

  个人血糖仪(PGM)由于其体积便携、成本低廉、操作简便、可用性广、定量结果可靠,是一种理想的便携式检测平台,已用于离子、小分子、核酸、蛋白质等检测。杂交链反应(HCR)是由起始分子或目标分子触发的一种立脚点介导的链置换反应。由于其方案简单,扩增效率高,已作为一种无酶信号扩增方法应用于核酸检测。基于PGM平台和HCR策略,开发了一种用于食品样品中金黄色葡萄球菌的敏感生物传感器。

  其检测原理可见图1,将捕获探针P结合固定在MBs上,然后与金黄色葡萄球菌适配体杂交。在金黄色葡萄球菌存在的情况下,适配体会发生偶联,导致MBs释放出适配体,捕获探针P被暴露,可以用作HCR的触发器。HCR后,在MBs表面形成了多条生物素- H1和生物素- H2交替存在的长线性DNA链。随后,链霉亲和素标记的转化酶被引入并通过生物素-链霉亲和素相互作用固定在MBs上。MBs上的转化酶可以催化蔗糖转化为葡萄糖,产生可读的信号,葡萄糖浓度由PGM量化。通过监测PGM信号,可实现对金黄色葡萄球菌的灵敏定量。在金黄色葡萄球菌缺失的情况下,捕获探针P与金黄色葡萄球菌适配体杂交,生物素H1和H2保持发夹结构,不能相互杂交发生HCR。

  图1 基于HCR策略的PGM便携式金黄色葡萄球菌检测原理示意图

  基于PGM平台和HCR策略成功制备了一种新型金黄色葡萄球菌生物传感器。由于HCR的级联信号放大,该生物传感器能够使用便携式PGM对金黄色葡萄球菌进行高度敏感的检测,LOD可降至2 CFU/mL。此外,该金黄色葡萄球菌生物传感器具有良好的抗干扰能力,已成功应用于真实食品样品中金黄色葡萄球菌的检测。该方法显著提高了HCR策略制备的传感器的灵敏度,为开发准确、灵敏、便携的病原菌检测分析工具提供了新的思路。

  结论:该基于PGM的敏感传感器能够成功地对真实食物样品中的金黄色葡萄球菌浓度进行检测,且检测结果与平板计数法检测结果一致。此外,与平板计数方法相比,PGM传感器可以大大缩短所需时间。该传感器为细菌致病菌的便携式快速检测提供了理想的解决方案,并在农业和食品企业的质量控制、出入境检验和食品质量检测中具有潜在的应用价值。

  参考文献:Yang Y, Wu T, Xu LP, Zhang X. Portable detection of Staphylococcus aureus using personal glucose meter based on hybridization chain reaction strategy. Talanta. 2021 May 1;226:122132.

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