沙门氏菌污染频发，传统检测方法面临挑战

沙门氏菌是全球最常见的食源性致病菌之一，每年导致数亿例食源性疾病。传统的细菌检测方法如培养法、PCR、qPCR等虽具有较高的准确性，但普遍存在操作复杂、耗时长、设备昂贵等问题，难以满足现场快速筛查的需求。随着CRISPR/Cas系统的发展，其在病原体检测中的应用日益广泛，但多数方法仍依赖多步操作，存在污染风险与灵敏度瓶颈。

OPRCC-eLFS：一锅法整合RPA与CRISPR/Cas12a

本研究开发的OPRCC-eLFS平台创新性地将重组酶聚合酶扩增（RPA）与CRISPR/Cas12a系统整合于单一反应体系中，避免了传统两步法操作中的开盖污染风险。通过优化引物浓度、crRNA与Cas12a比例、反应温度与时间等关键参数，研究团队实现了RPA高效扩增与Cas12a精准切割的平衡，显著提升了检测灵敏度与稳定性。

双模式输出：视觉判读+电化学定量

OPRCC-eLFS平台采用双信号输出策略：

视觉模式：通过金纳米粒子（AuNPs）在T线显色，实现快速定性判断；

电化学模式：利用AuNPs催化Fe³⁺还原反应，在T线产生电流信号，实现高灵敏定量检测。

在优化条件下，该平台对沙门氏菌的视觉检测限为384 CFU/mL，电化学检测限低至1.96 CFU/mL，线性范围覆盖3.84至3.84×10⁷ CFU/mL，展现出优异的检测性能。

高特异性与稳定性，适配现场快速筛查

OPRCC-eLFS对沙门氏菌不同血清型均表现出良好响应，而对非目标菌如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等无交叉反应，显示出极高的特异性。同时，该平台在30天内的储存稳定性良好，重复检测相对标准偏差（RSD）仅为6.42%，批次间一致性RSD为9.02%，满足现场反复使用的需求。

关键发现

1、成功将RPA与CRISPR/Cas12a整合于单一反应体系，避免传统两步法操作中的污染风险，显著提升检测效率与灵敏度，电化学检测限低至 1.96 CFU/mL。

2、在牛奶、橙汁、鸡蛋、三文鱼等多种食品样本中均保持优异检测性能，检测限稳定，结果与商用qPCR试剂盒高度一致，验证其在实际应用中的广泛适用性。

3、对沙门氏菌不同血清型均具良好响应，对非目标菌无交叉反应；重复检测RSD为6.42%，30天内储存稳定性RSD为9.49%，满足现场反复使用需求。

未来展望与应用潜力

研究团队表示，OPRCC-eLFS平台不仅适用于沙门氏菌检测，其模块化设计还可拓展至其他食源性病原体（如李斯特菌、大肠杆菌O157:H7等）的检测。未来，该平台有望开发为便携式设备，广泛应用于食品安全监管、基层检验检疫、甚至家庭自测等场景，推动分子诊断技术在公共卫生领域的普及与落地。