万古霉素功能化磁珠结合滚圈扩增荧光检测果汁中的金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌简称金葡菌,是引起食源性疾病的重要病原菌之一。在我国,由食源性致病菌导致的食源性疾病中金黄色球菌排在第三位。当金黄色葡萄球菌侵入人体后,会引起化脓性感染、食物中毒、烫伤样皮肤综合征、毒素休克综合征等疾病。因此,做好金黄色葡萄球菌的检测,防止“病从口入”还是非常重要的。
什么是金黄色葡萄球菌?
金黄色葡萄球菌(S. aureus)是一种有较强传播力的革兰氏阳性菌,该菌最适宜生长温度为37℃,pH为7.4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。因此,该菌的存在严重影响食品安全,对消费者健康构成威胁。金黄色葡萄球菌引起的食物中毒是目前食品安全的主要问题之一,生鱼及其制品在加工、运输和销售过程中极易受到微生物污染金黄色葡萄球菌严重污染肉类及其制品。因此,对肉类中金黄色葡萄球菌的敏感检测对食品安全和人体健康至关重要。
怎么检测金黄色葡萄球菌?
迄今为止,平板培养法、酶联免疫吸附法、分子生物学检测等方法主要用于不同基质中食源性致病菌的检测。这些方法不仅需要昂贵的仪器和高技能的工人,还涉及复杂的样品预处理和耗时,限制了它们在食品安全和保障中的应用。因此,建立一种灵敏快速的金黄色葡萄球菌检测方法显得尤为重要。
在本文中,作者建立了一种灵敏、快速检测食品中金黄色葡萄球菌的方法。该方法将磁分离技术应用于食品样品的预处理过程中,并将本研究制备的万古霉素功能化磁珠(Van-MBs)作为第一个识别分子从食品基质中分离金黄色葡萄球菌。生物素-猪IgG作为第二种识别分子与金黄色葡萄球菌结合。金黄色葡萄球菌检测采用RCA技术,通过BAS系统将生物素-RCA探针引入策略中。在酶的作用下,触发RCA反应,实现信号放大。对于特异性检测,该方法使用生物素标记猪IgG。在最佳条件下,果汁中Van-MBs联合RCA检测的LOD为3.3×102 CFU/mL。
图 1 万古霉素功能化磁珠结合滚圈扩增荧光检测果汁中的金黄色葡萄球菌检测原理图
结论:该方法对金黄色葡萄球菌具有良好的选择性和准确性。因此,本文开发的方法是一种快速有效的检测食品样品中金黄色葡萄球菌的方法。该方法可为金黄色葡萄球菌的检测提供强有力的理论依据。
参考文献:Wang Y, Wang Z, Zhan Z, Liu J, Deng T, Xu H. Fluorescence detection of Staphylococcus aureus using vancomycin functionalized magnetic beads combined with rolling circle amplification in fruit juice. Anal Chim Acta. 2022 Jan 2;1189:339213. doi: 10.1016/j.aca.2021.339213. Epub 2021 Oct 27. PMID: 34815035.
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