肠道中空肠弯曲菌的一种新型检测方法
原创 发布时间:2022-10-11 浏览次数: 1285 来源: 王康

核心提示:当你肚子不舒服时,可能会想着忍一会就过去了,如果忍不住了再去医院看看。可你是否想过到底是什么原因、什么菌类、什么病毒引起的呢?本文就是在阐述一种肠道中人类腹泻最常见的病原菌之一—空肠弯曲菌的一种新型检测方法。


  当你肚子不舒服时,可能会想着忍一会就过去了,如果忍不住了再去医院看看。可你是否想过到底是什么原因、什么菌类、什么病毒引起的呢?本文就是在阐述一种肠道中人类腹泻最常见的病原菌之一—空肠弯曲菌的一种新型检测方法。


  首先我们来介绍一下空肠弯曲菌,它的英文名为Campylobacter jejuni,菌体轻度弯曲似逗点状,长1.5~5μm,宽0.2~0.8μm。菌体的一端或两端有单鞭毛,运动活泼,在暗视野镜下观察似飞蝇,无荚膜,不形成芽胞,微需氧菌,在含2.5%-5%氧气或10%二氧化碳的环境中生长最好。最适生长温度37℃-42℃。空肠弯曲菌的抵抗力不强,易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭,对低温敏感,室温下(20℃-23℃)很快死亡,该菌有内毒素能侵袭小肠和大肠黏膜引起急性肠炎,也可引起腹泻的暴发流行或集体食物中毒。同时,空肠弯曲菌对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。近年发现了不少耐药菌株,及多重耐药性菌株。由于空肠衣原体生长缓慢,传统的培养检测技术既费时又费力。此外,主要问题是假阴性结果和基于培养的方法的灵敏度不足。目前,基于核酸的分子技术,如PCR和qPCR(实时定量PCR),用于检测食源性病原体。然而,对复杂而昂贵的仪器的需求以及模板DNA的纯度使它们无法广泛用于常规检测。

  环介导的等温扩增(LAMP)是一种创新技术,利用BstDNA聚合酶的自循环链置换行为,在等温条件下扩增核酸,LAMP可以在任何加热块或恒温干浴中轻松运行。其过程为:首先提取基因组DNA,然后进行灯底漆设计与灯测定,随着进行聚合酶链式反应,最后进行LAMP的测定。结果显示LAMP可生产的DNA量比PCR高一倍,对抑制剂的敏感性相对较低。因此,LAMP可以成为检测和鉴定食源性细菌病原体的快速而简单的工具。

  综上所述,开发了一种灵敏、特异、快速、实用的空肠衣原体检测LAMP方法,LAMP测定的另一个重要优点是,可以根据白色沉淀物直接用肉眼判断结果,从而提供与凝胶电泳数据一致的结果。总体而言,用于检测空肠衣原体的LAMP技术在临床、现场和资源匮乏的环境中是一种有价值的工具。

  参考文献:Ying Liu , Meidi Xu, Jiang Wang, Yang Cao , Tao Wang , Lan Mu , Chao Niu.Detection of Campylobacter jejuni Based on a Real-Time Fluorescence Loop-Mediated Isothermal Amplification Method,2022.8

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