你了解临床致病微生物的检测吗?

你了解临床致病微生物的检测吗?

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来源:王峥峥
2024-04-18 18:10:40
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核心提示:根据病人的症状,医生的初步考虑属于某个部位感染就留取此部位的样本进行细菌检查。常用于微生物检查的标本有:血液、大便、痰、尿、脑脊液、胸水、腹水、关节液、各种拭子、各种分泌物、各种排泄物、各种穿刺液等。

  用于检测病原微生物的标本有哪些?

  根据病人的症状,医生的初步考虑属于某个部位感染就留取此部位的样本进行细菌检查。常用于微生物检查的标本有:血液、大便、痰、尿、脑脊液、胸水、腹水、关节液、各种拭子、各种分泌物、各种排泄物、各种穿刺液等。

  检测方法

  生物化学方法

  原理:生化方法检测病原微生物实际上是测定微生物特异性酶。由于各种微生物所具有的酶系统不完全相同,对许多物质的分解能力亦不一致。因此可利用不同底物产生的不同代谢产物来间接检测该微生物内酶的有无,从而达到检测特定微生物的目的。如沙门氏菌能产生辛酯酶,这一-性能是除沙门氏菌外的各属肠杆菌科细菌所不具备的。

免疫学方法

  免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。为了显示和观察这种抗原抗体反应,需要预先将某种标记物结合到抗体上,借标记物的荧光或酶的有色反应、放射性或高电子密度,在光镜或电镜下进行定性、定位或定量研究。各种形式的免疫分析方法如放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)、间接酶联免疫吸附(ELISA)、荧光免疫分析(FIA)、生物发光免疫分析(BIA)、化学发光免疫分析(CIA)等,直

  接检测微生物或通过间接检测微生物的成份及微生物代谢产物(如毒素)检出微生物。

  分子生物学方法

  核酸杂交法

  核酸杂交有原位杂交、打点杂交、斑点杂交、Sorthern 杂交、Northern杂交等,它们共同的特点是:(1)都是应用复性动力学原理;(2)都必须有探针的存在。核酸分子探针又可根据它们的来源和性质分为DNA探针、cDNA探针、RNA探针及人工合成的寡聚核苷酸探针等。

  原理:通过标记根据病原体核酸片段制备的探针与病原体核酸片段杂交,观察是否产生特异的杂交信号。核酸探针技术具有特异性好、敏感性高、诊断速度快、操作较为简便等特点。目前,已建立了多种病原体的核酸杂交检测方法,尤其是近年来发展起来的荧光原位杂交技术(FISH)更为常用。

  分子生物学与免疫学相结合的方法

  免疫PCR(immuno polymerase chain reaction ,IM PCR)是一种检测微量抗原的高灵敏度技术。

  该技术把抗原抗体反应的高特异性和聚合酶链反应的高敏感性有机结合起来,它的基本原理是用一段已知DNA分子标记抗体作为探针,用此探针与待测抗原反应, PCR扩增粘附在抗原抗体复合物上的这段DNA分子,电泳定性根据特异性PCR产物的有无,来判断待测抗原是否存在。

  生物芯片

  生物芯片技术是将生物大分子,如寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、肽、抗原以及抗体等固定在诸如硅片、玻璃片、塑料片、凝胶和尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵当待测样品中的生物分子与生物芯片的探针分子发生杂交或相互作用后,利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行检测和分析。根据生物芯片上探针的分子种类而将之分为DNA芯片(即基因芯片)和蛋白质芯片。微生物检测基因芯片是指用来检测样品中是否含有微生物目的核酸片段的芯片。基于高通量、微型化和平行分析的特点,微生物检测基因芯片在微生物病原体检测、种类鉴定、功能基因检测、基因分型、突变检测、基因组监测等研究领域中发挥着越来越重要的作用。

  蛋白质指纹图谱技术

  蛋白质指纹图谱技术是随着蛋白质组学兴起的一种新技术,用于各种疾病特异性蛋白指纹的识别和判断,可以直接检测不经处理的尿液、血液或细胞裂解液等。人体血清里有成千上万个蛋白,人一旦发生了某种疾病,蛋白质成分就必然会起变化。蛋白指纹图谱技术,它形象地将检查结果比喻为指纹或超级市场中各种商品.上的条码标签,通过检测分析系统就能识别被测的是那一种蛋白,简单来说就是将测定图谱与图谱库对照,比较发现差异。

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