用于检测小肠结肠炎耶尔森菌关键毒力因子YadA的电化学适配传感器

在这项工作中，首次通过cell-SELEX与高通量测序（High-throughput sequencing, HTS）和生物信息学分析相结合的方式，选择了对小肠结肠炎耶尔森氏菌重要疾病标志物YadA具有高亲和力的适配体。使用cell-SELEX能够选择适配体，使其对YadA进行重组表达。随后，将最佳候选适配体（Apt1）固定在金丝网印刷电极（Au-SPE）上，用于表达YadA的大肠杆菌细胞的电化学检测。此外，该适配传感器的性能已成功得到验证，从而产生了一种新型、灵敏和选择性的POC检测系统，该系统有可能用于诊断小肠结肠炎耶尔森氏菌感染。

图 1 cell-SELEX循环中涉及的步骤图

图 2 用于检测YadA粘附素的电化学生物传感器的构建和工作中的顺序步骤的示意图

结论：这项研究开发了一种简单灵敏的无标记电化学适配传感器，用于检测小肠结肠炎杆菌的粘附素YadA。cell-SELEX选择了一种新的DNA适配体，该适配体对YadA具有较高的亲和力。随后，用适配体对Au-SPE进行了修饰，所得适配传感器显示出高灵敏度和重现性，对小肠结肠炎耶尔森氏菌YadA样品的LOD为7.0×10⁴CFU/mL,并且在含有其他细菌菌株的混合样品的初步研究中显示出良好的选择性。将来，用于开发这种适配体传感器的方法和工作流程也可以用作开发其他生物传感器的模型，用于检测其他细菌靶标。

参考文献：Sande MG, Ferreira D, Rodrigues JL, Melo LDR, Linke D, Silva CJ, Moreira FTC, Sales MGF, Rodrigues LR. Electrochemical Aptasensor for the Detection of the Key Virulence Factor YadA of Yersinia enterocolitica. Biosensors (Basel). 2022 Aug 8;12(8):614. doi: 10.3390/bios12080614. PMID: 36005012; PMCID: PMC9405658.