噬菌体诱导的“一对多”FRET传感器，用于检测大肠杆菌O 157：H7 的高灵敏度检测

其主要原理为: M13 噬菌体被工程化以展示E. coli O 157：H7 结合肽（O 157 S）和P8蛋白上的链霉亲和素结合肽（SBP），产生生物功能化的M13噬菌体（O 157 S-M13 K 07-SBP）（图1B）。链霉亲和素标记的荧光供体（_{SA-QD 460} ）和受体（_{SA-QD 620} ）可以容纳在O 157 S-M13 K 07-SBP的表面上，产生FRET探针（_{O 157 S-M13 K 07-QD 460 /QD 620} ）（图1C）。此外，用E. coli O 157：H7适体（MB-Apts）用于初始捕获E.大肠杆菌O 157：H7的核酸适体-E.大肠杆菌O 157：H7相互作用。利用工程化的M13作为FRET容器，MB-Apts作为捕获探针，开发了用于快速和精确检测E. coli O157：H7。 为了全面评估所开发的传感器的性能，进行了灵敏度，选择性和储存稳定性的评价。最后，将该方法应用于大肠杆菌的检测，以验证其准确性、精密度、重复性和实用性。大肠杆菌O157在其他食物样本，如牛奶，生菜和猪肉，通过平板计数法进行验证。

图 1 A.噬菌体M13的结构。使用PyMol（www.pymol.org）产生M13噬菌体结构，坐标从RCSB蛋白质数据库（www.pdb.org）获得。在M13的外表面处以黄色突出显示的氨基酸残基代表N-末端丙氨酸，其中插入SBP .B.通过两步定点突变构建O 157 S-M13 K 07-SBP噬菌体载体。C. O 157 S-M13 K 07-SBP诱导和扩增的FRET传感器用于高灵敏度检测E. coli O157：H7。

文章主要建立了一个噬菌体诱导的FRET平台，用于快速、灵敏地检测大肠杆菌O 157：H7，为该领域的一种新方法。利用O 157 S-M13 K 07-SBP支架，FRET可以从SA-QD 460 到SA-QD 620 发生。值得注意的是，单个识别事件可以触发O 157 S-M13 K 07-SBP上的多次FRET发生，最终实现“一对多”的检测效果。所得到的噬菌体诱导的FRET传感器表现出优异的检测性能，拥有6 CFU/mL的LOD值。此外，该传感器具有值得称赞的选择性，准确性，精密度，再现性和稳定性。在此基础上，我们预计，所提出的噬菌体诱导的FRET传感器可以作为一个通用的平台，用于开发各种FRET传感器针对其他分析物，简单地通过修改识别肽内的P3蛋白。

参考文献：Phage-induced “one-to-many” FRET sensor for highly sensitive detection of Escherichia coli O157:H7.