裂解酶LysPFX32:对抗荧光假单胞菌的新型生物抗菌剂
荧光假单胞菌是一种重要的腐败菌,广泛存在于高蛋白食品中,能够产生脂肪酶、蛋白酶等酶类,导致食品腐败变质。传统的食品保鲜方法如热处理、化学防腐剂等,虽然能有效抑制微生物生长,但可能会改变食品的风味和质地。因此,开发新型、安全的抗菌剂成为食品科学领域的研究热点。
1.研究方法
研究人员从中国武汉的污水中分离出荧光假单胞菌噬菌体PFX2,并预测了其编码的裂解酶LysPFX32。通过基因克隆和表达技术,将LysPFX32基因插入pET-28b(+)表达载体中,在大肠杆菌BL21中表达并纯化。随后,通过浊度降低实验评估LysPFX32的溶菌活性,并利用扫描电子显微镜(SEM)观察其对细菌细胞形态的影响。
2.实验结果
实验结果显示,LysPFX32在EDTA预处理后对荧光假单胞菌展现出强溶菌活性,最小抑制浓度为95 μg/mL。分子对接实验表明,LysPFX32能有效结合肽聚糖片段,破坏细菌细胞膜的完整性,导致细胞内容物泄漏。此外,LysPFX32还能有效抑制生物膜的形成,并去除成熟的生物膜,通过抑制胞外多糖和总蛋白实现
关键结论
1、抑菌效果:LysPFX32作为一种新型的生物抗菌剂,对荧光假单胞菌及其生物膜具有显著的抑制和去除效果。
2、保鲜作用:在猪肉保鲜实验中,LysPFX32处理的猪肉在28°C下24小时后,荧光假单胞菌的数量显著减少,且在4°C下储存8天期间,肉质保持良好,胺类产生减少。
3、安全性:此外,LysPFX32在小鼠红细胞中表现出极低的溶血性,并且对NIH 3T3细胞无细胞毒性,显示出良好的生物安全性
总结
本研究通过生物信息学分析、克隆、表达和纯化等手段,成功开发了一种新型的噬菌体裂解酶LysPFX32,用于对抗荧光假单胞菌及其生物膜。LysPFX32不仅在实验室条件下表现出良好的抗菌效果,还在猪肉保鲜中展现出实际应用潜力。未来的研究可以进一步探索LysPFX32的分子机制,以及其在不同环境条件下的应用效果
文章来源:
Peng Guan et al. Expression and characterization of a novel endolysin LysPFX32 as potential biological antimicrobial agent against Pseudomonas fluorescens for pork preservation. International Journal of Biological Macromolecules, 2025. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2024.139448
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