噬菌体B13S及其内溶素PlyB13S:新型抗菌与检测利器

噬菌体B13S及其内溶素PlyB13S:新型抗菌与检测利器

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来源:金辉
2025-06-05 10:12:00
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核心提示:韩国首尔科学技术大学的研究人员分离出一种新型B. cereus特异性噬菌体B13S,并对其内溶素PlyB13S进行了深入研究。研究表明,PlyB13S具有广泛的溶菌谱和强大的抗菌能力,可有效去除B. cereus生物膜,并在食品中展现出良好的应用前景。

Bacillus cereus是一种革兰氏阳性、产芽孢的细菌,常见于米饭、干辣椒和谷物等食品中。该菌可产生肠毒素和呕吐毒素,分别导致腹泻和呕吐等症状。此外,B. cereus还会在食品接触表面(如管道、玻璃、储罐和传送带)形成生物膜,加剧食品污染问题。因此,开发有效的B. cereus检测和控制方法对于食品行业至关重要。

1. 研究方法

噬菌体B13S的分离与鉴定

研究人员从韩国首尔的下水道污泥样本中分离出B13S噬菌体。通过噬菌斑形成实验,发现B13S仅能感染24B. cereus菌株中的2株,显示出独特的宿主范围。透射电子显微镜(TEM)观察显示,B13S属于Myoviridae科,具有厚且可收缩的尾部。此外,研究人员对B13S的基因组进行了测序和注释,发现其基因组为155.77 kb的双链环状DNA,包含222个开放阅读框(ORFs

内溶素PlyB13S的克隆与表达

研究人员克隆了B13S噬菌体编码的内溶素PlyB13S基因,并在大肠杆菌中进行了表达和纯化。PlyB13S包含一个保守的N端糖苷水解酶25结构域,但其C端区域在保守结构域数据库中未找到匹配项。通过AlphaFold2预测的PlyB13S三维结构显示,该蛋白由两个独立的结构域通过一个柔性连接区连接

关键结论

1.PlyB13S的溶菌活性:实验结果表明,PlyB13S能够快速裂解B. cereus细胞,并且其溶菌谱比亲本噬菌体更广。PlyB13S对所有B. cereus菌株均具有溶菌活性,还能裂解除B. licheniformisB. circulans外的其他蜡样芽孢杆菌属成员。此外,PlyB13SpH 7时活性最高,在pH 6.5–8.5范围内仍能保持60%以上的溶菌活性。在热稳定性方面,PlyB13S-20°C37°C范围内能保持80%以上的溶菌活性,但在50°C时活性显著下降。

2.PlyB13S对生物膜的影响:研究人员发现,PlyB13S能够有效去除B. cereus在聚苯乙烯表面形成的生物膜,去除率超过60%。此外,PlyB13S还能显著减少不锈钢表面B. cereus生物膜中的活菌数。这表明PlyB13S不仅具有良好的溶菌能力,还能有效去除生物膜,这对于食品加工设备的清洁和消毒具有重要意义。

3.PlyB13S在食品中的应用:为了评估PlyB13S在食品中的抗菌效果,研究人员将其应用于煮熟的米饭样本中。结果表明,PlyB13S能够在45分钟内将B. cereus的活菌数减少约1 log CFU/mL,而在更高的浓度(3 μM)和更长的处理时间(90分钟)下,PlyB13S可将B. cereus的活菌数减少2 log CFU/mL。这表明PlyB13S在食品中具有良好的抗菌效果,有望作为食品防腐剂的替代品。

本研究深入探讨了B. cereus噬菌体B13S及其内溶素PlyB13S的特性,揭示了PlyB13S作为一种新型抗菌和检测工具的潜力。PlyB13S不仅具有广泛的溶菌谱和强大的抗菌能力,还能有效去除B. cereus生物膜,并在食品中展现出良好的应用前景。未来的研究可以进一步探索PlyB13S的作用机制,以及其在不同食品和环境条件下的应用效果,为食品行业的微生物控制提供新的解决方案。

文章来源:

Yu B, Kong M. Characterization of an endolysin from B. cereus-infecting bacteriophage B13S and its application as antimicrobial and detection agents. LWT - Food Science and Technology. 2025;216:117345. doi:10.1016/j.lwt.2025.11734

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