ABD是一种基因工程改造的“细菌杀手”，其核心设计包括：利用金黄色葡萄球菌致病岛（SaPI）—一类可在细菌间自然转移的移动遗传元件。武器系统：将SaPI原有的毒力基因替换为CRISPR/Cas9靶向切割细菌关键基因（如agrA），直接杀死宿主菌。抗性标记：最初选用四环素抗性基因（tetM）用于追踪ABD。递送方式：借助辅助噬菌体的包装能力，将ABD DNA包裹在噬菌体样颗粒中，像“微型导弹”一样侵入目标细菌。与传统抗生素不同，ABD能精准攻击耐药菌，且不受抗生素耐药性影响。

评估ABD效能时，研究者发现一个惊人矛盾，搭载CRISPR武器的ABD实际杀灭的细菌数量，比通过tetM标记检测到的转导菌落数高出5-23倍。单细胞追踪显示，携带tetM的ABD进入细菌后，仅50%成功整合到染色体。剩余50%在细胞内“游荡”长达30代才整合，期间反复表达CRISPR导致细胞死亡。即使不添加四环素，tetM本身也会延迟ABD DNA整合。将tetM替换为镉抗性基因（cadA）后，ABD整合效率立即提升。TetM蛋白通过改变核糖体结构解除四环素抑制，可能意外干扰DNA修复或整合。四环素存在时直接阻断蛋白质合成，进一步抑制抗性表达。

在真实病原体中测试ABD时，发现新障碍，实验室标准菌株（如NCTC8325）：ABD杀伤效率近100%。临床菌株（如USA300）：>95% ABD递送失败，因细菌限制酶降解外源DNA。菌株Newman携带的前噬菌体φNM1使ABD整合效率降低30倍。70个感染细胞中仅1个成功整合ABD。改造ABD绕过限制系统或联合使用限制酶抑制剂。

抗生素抗性基因不仅是工具，还可能破坏基因治疗载体功能。本研究重新定义效价，杀伤率而非转导率才是ABD的核心效能指标。细菌限制系统与前噬菌体是基因疗法的重要路障。

参考文献：

Dhasmana, N., Ram, G., McAllister, K. N., Chupalova, Y., Lopez, P., Ross, H. F., & Novick, R. P. (2021). Dynamics of Antibacterial Drone Establishment in Staphylococcus aureus: Unexpected Effects of Antibiotic Resistance Genes. mBio, 12.