生肉保鲜新武器!广谱噬菌体可高效杀灭耐药大肠杆菌
生肉保鲜新武器!广谱噬菌体可高效杀灭耐药大肠杆菌
研究背景
禽致病性大肠杆菌(APEC)每年造成全球禽业数十亿美元损失,并通过食物链威胁公共健康。由于抗生素滥用,多重耐药APEC菌株激增,被WHO列为重点耐药病原体。噬菌体作为"细菌天敌",因其特异性强、不易产生耐药性且环境友好,成为替代抗生素的热门候选者。
关键发现
广谱裂解能力
通过双层琼脂平板法测试75株临床分离的APEC菌株,噬菌体vB_EcoM_SD350可裂解其中48株(64%),包括对庆大霉素、头孢噻肟等常用抗生素耐药的菌株。透射电镜显示其具有典型的肌尾病毒科特征:正二十面体头部(90±2 nm)和非收缩性尾部(80±2 nm)。
极端环境耐受性
该噬菌体40-60℃处理1小时存活率>90%,70℃处理20分钟存活率仍达75%,80℃完全失活;在pH 3-13范围内保持高活性,仅在强酸(pH 1-2)和强碱(pH 14)环境下显著失活;最佳感染复数(MOI)为0.01,潜伏期<10分钟,爆发量达26 PFU/细胞。
强力抑制生物膜
在96孔板中,噬菌体处理(MOI 0.0001-1)使APEC生物膜形成量降低40-65%,且呈现剂量依赖性。
该能力源于其编码的穿孔素-内溶素系统:ORF44编码的穿孔素可破坏细胞膜,ORF45编码的内溶素则降解肽聚糖层。
机制与安全性
全基因组测序(GenBank: OR911937)显示该噬菌体为52,757 bp的双链DNA,GC含量47.73%,携带穿孔素(ORF44)和内溶素(ORF45)基因,与沙门氏菌噬菌体同源性>98%。未检测到细菌毒素基因、抗生素耐药基因及溶原化相关基因(整合酶/抑制酶)。该噬菌体属于尾病毒纲(Caudoviricetes),与大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_swi3基因组相似性达98.2%
结论与展望
本研究证实噬菌体vB_EcoM_SD350可通过其独特的穿孔素-内溶素系统高效裂解耐药性禽致病性大肠杆菌(APEC),在4℃冷藏条件下对生肉中的病原菌杀灭率达99.99%,且基因组无毒素、耐药基因及溶原化风险,安全性显著。其广谱性(64%临床菌株有效)、极端环境耐受性(pH 3-13,40-60℃稳定)及生物膜抑制能力,为替代抗生素控制肉类污染提供了可靠方案。
参考文献:
HUANG Y, PANG Z, ZHU X, et al. Characterization and genomic analysis of a broad-spectrum lytic phage vB_EcoM_SD350 and its application on raw chicken and beef meats against Avian pathogenic Escherichia coli [J]. Food Science and Technology, 2025, 222: 117618.
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