背景知识

VERO 细胞是病毒疫苗和溶瘤病毒生产的核心宿主，但传统培养依赖 10 % 胎牛血清（FBS）。FBS 存在批次差异大、潜在病毒污染、供应链和伦理风险；现有无血清配方多用未定义的“植物水解产物”，导致性能波动。因此，开发一种无血清、化学成分完全明确且可规模化的 VERO 专用培养基是行业迫切需求。

14 代倍增：OptiVERO 追平血清、超越植物水解物

研究方法

1、成分设计

采用 DOE（Plackett-Burman 筛选 → 最速上升 → 中心复合设计），从 37 种候选因子中筛选并优化。

2、关键替代

用重组人白蛋白（Cellastim S）和重组人转铁蛋白（Optiferrin）完全取代血清及植物水解物，辅以重组 EGF 等少量已知成分，构成“OptiVERO”配方。

3、性能验证

• 2D 连续 14 次传代，计算累积群体倍增。
• 3D 微载体搅拌培养，监测细胞扩增与代谢。

病毒产毒实验：登革热病毒（DENV-2）、寨卡病毒（ZIKV）、埃博拉ΔVP30，分别测定 PFU 滴度。

研究结果

1、生长

OptiVERO 的累积群体倍增（42.99 ± 5.68）与 EMEM-10 % FBS（40.07 ± 4.16）无差异，显著高于 VP-SFM（36.15 ± 4.44，p ≤ 0.01）。

2、3D 扩增

OptiVERO 在 9 天内细胞密度持续高于 VP-SFM，贴附与增殖更快。

3、病毒产量

DENV-2 微载体 9 dpi：OptiVERO 5.3 × 108 PFU/mL ≥ 其他两组。

ZIKV 4 dpi：OptiVERO 1.75 × 108 PFU/mL，与对照差异无统计学意义。

EbolaΔVP30 6 dpi：OptiVERO 1.74 × 107 PFU/mL，比 VP-SFM 高 1 log（p ≤ 0.05）。

结论

OptiVERO 是首个无血清、无动物源且化学成分完全明确的 VERO 专用病毒生产培养基。其以两种可规模化重组蛋白为核心，消除了血清与植物水解物带来的安全风险与批次波动，在 2D 与 3D 体系中均支持 VERO 高效扩增与多病毒高产，为疫苗与溶瘤病毒制造提供了安全、稳定、可监管的新工艺平台。

参考来源：

Alfano R, Pennybaker A, Halfmann P, Huang CY. Formulation and production of a blood-free and chemically defined virus production media for VERO cells. Biotechnol Bioeng. 2020 Nov;117(11):3277-3285. doi: 10.1002/bit.27486. Epub 2020 Aug 1. PMID: 32648943; PMCID: PMC7689730.