牛肉腐败与荧光假单胞菌危害：牛肉因水分活度高、营养丰富，易被微生物代谢导致腐败；荧光假单胞菌是冷藏牛肉的主要特定腐败菌（SSO），具有强蛋白水解活性和低温适应性，且易在多种表面形成致密生物膜，造成食品加工环境中的交叉污染。

生物膜的危害加剧：生物膜中的细菌被胞外聚合物（EPS）包裹，可使细菌对环境压力和抗菌剂的抗性提升高达 1000 倍，给肉类工业的卫生消毒带来重大挑战，因此有效控制牛肉中荧光假单胞菌对保障食品质量至关重要。

噬菌体的应用优势与研究缺口：噬菌体作为天然的宿主特异性裂解剂，不影响有益微生物群，且部分噬菌体编码的解聚酶可降解 EPS、破坏生物膜结构，是化学杀菌剂的安全替代方案；目前已有噬菌体相关商业产品获批用于食品微生物控制，但针对牛肉及食品加工表面荧光假单胞菌生物膜的噬菌体策略仍未得到充分探索。

噬菌体 PFX2 的分离与表征：

从武汉市场购买的黄牛肉样本中，以荧光假单胞菌 ATCC 13525 为宿主菌，通过双层琼脂平板法分离纯化 PFX2；系统研究其宿主谱（仅裂解荧光假单胞菌 ATCC 13525）、形态结构（二十面体头部 + 短尾）、最佳感染复数（MOI=0.001 PFU/CFU）、吸附效率（9 分钟吸附率达 80.18%）、一步生长曲线（潜伏期 10 分钟，爆发量 67.51 PFU/CFU）及环境稳定性（30-40℃、pH 3-11、5% 氯仿条件下稳定）。

PFX2 基因组分析：

采用酚 - 氯仿法提取 PFX2 基因组 DNA，通过全基因组测序获得其序列（大小 38103bp，G+C 含量 61.57%）；分析显示其含 42 个开放阅读框（21 个有明确功能），且无抗菌抗性基因和细菌毒力相关基因；进化分析表明其与荧光假单胞菌噬菌体 BIM BV-45 亲缘关系近，属 Autographiviridae 科 Bifseptvirus 属。

PFX2 抑菌与抗生物膜活性验证：

通过时间 - 杀灭曲线实验，验证 PFX2 在营养肉汤和牛肉中（4℃、25℃）对荧光假单胞菌的抑制效果；采用结晶紫染色和活菌计数法，测定 PFX2 对荧光假单胞菌生物膜形成的抑制作用（共培养 18 小时抑制率 81.53%）及对成熟生物膜的去除效果（2 小时去除率超 70%）。

PFX2 在实际场景中的应用评估：

测试 PFX2 对牛肉表面成熟生物膜的去除效果（2 小时去除率 97.52%），及对玻璃、不锈钢、PE 塑料等加工表面生物膜的控制效果（2 小时去除率 97.81%-99.80%）；通过场发射扫描电子显微镜（FE-SEM）和共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）观察生物膜形态变化；同时评估 PFX2 对牛肉颜色（L*、a*、b*）和质地（硬度、弹性等）的影响，确认其不改变食品品质。

参考文献：

Ming Z, Liu X, Ding Y, et al. Characterization of a novel phage PFX2 and its preliminary application in the biocontrol of Pseudomonas fluorescens biofilms on fresh beef[J]. Meat Science, 2025: 109902.