新型弯曲杆菌噬菌体CC_R7的特性及其在鸡肉中的生物防控应用
新型弯曲杆菌噬菌体CC_R7的特性及其在鸡肉中的生物防控应用
弯曲杆菌是一种主要的食源性病原体,通常通过家禽传播。由于家禽养殖中抗生素过度使用而导致的多重耐药菌株的出现凸显了监测耐药模式和探索替代控制策略(例如噬菌体应用)的必要性。本研究检查了空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌的抗菌素耐药模式。此外,还分离出一种新型裂解弯曲杆菌噬菌体CC_R7,并进行了完整的基因组分析。评估了噬菌体CC_R7在屠宰场条件下去除生物膜和作为鸡肉生物防治剂的应用。结果表明,结肠弯曲杆菌的耐药率高于空肠弯曲杆菌。噬菌体CC_R7的基因组大小为 180,566 bp,未发现毒性基因。宿主范围广,可杀灭60%的结肠弯曲杆菌和27.2%空肠弯曲杆菌测试菌株,吸附性好,潜伏期短,爆发量高。噬菌体4 ℃–50 ℃和 pH 值4–10下保持稳定。此外,噬菌体CC_R7有可能抑制生物膜的形成,并将鸡肉中的弯曲杆菌污染减少 1.2 log/g。因此,弯曲杆菌噬菌体CC_R7具有对抗多重耐药弯曲杆菌菌株的独特特性,可作为食品生物防治的饲料添加剂。
1、弯曲杆菌耐药性情况
结肠弯曲杆菌(C. coli)耐药性普遍高于空肠弯曲杆菌(C. jejuni)。
表:C. coli vs C. jejuni 耐药率对比
2、噬菌体CC_R7的分离与形态
噬菌体CC_R7属于肌尾病毒科(Myoviridae),头部直径97.4 ± 5.66 nm,尾部长度:126.8 ± 3.2 nm,噬菌斑清晰透明,直径1–2 mm。
图1:噬菌体CC_R7的分离与形态
3、噬菌体CC_R7基因组特征
噬菌体CC_R7基因组大小为180,566 bp,GC含量27.8%,ORF数量为200个(87个有功能注释),且无毒力基因、耐药基因、溶原相关基因,属于Firehammervirus属,与CP220相似度93.84%。
图2:噬菌体CC_R7基因组图谱
4、生物学特性
噬菌体CC_R7在 5分钟内吸附50%,潜伏期为40分钟,爆发量为119 PFU/细胞。
图3: 吸附率及一步生长曲线
温度稳定性:4–50℃稳定,60℃以上失活; pH 4–10稳定。
图4: 温度及pH稳定性
5、宿主范围与裂解能力
噬菌体CC_R7可以裂解60% C. coli 和27.3% C. jejuni,最强裂解活性来自湖北分离株,液体培养基中MOI=0.1时抑菌效果最佳。
图5:裂解试验
6、生物膜清除与鸡肉应用
噬菌体CC_R7在MOI=100时显著减少生物膜形成(42°C和10°C)在鸡肉抑菌试验种,24小时后可使得细菌载量下降1.2 log CFU/g。
图6:噬菌体CC_R7在生物膜及鸡肉中的应用
结论:CC_R7是一株安全、高效、广宿主范围的弯曲杆菌噬菌体,具备良好的温度与pH稳定性,适用于食品工业环境,能有效减少鸡肉中弯曲杆菌污染,具备生物防控潜力。
参考来源:https://doi.org/10.1016/j.crfs.2025.101182
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