呼吸道合胞病毒（RSV）与人偏肺病毒（HMPV）是五岁以下婴幼儿和老年人肺炎、毛细支气管炎的首要元凶，每年导致全球超过三千万人就诊。尽管2023年起三款RSV pre-F蛋白疫苗或mRNA疫苗获批用于成人，但儿童领域仍空白，且HMPV尚无疫苗上市。法国-加拿大联合团队依托“RESPIVIR”国际实验室，在《npj Vaccines》报告其鼻喷双价减毒活疫苗Metavac®-RSV完成关键工艺放大与动物概念验证，向儿科通用疫苗迈出坚实一步。

Metavac®-RSV以HMPV冷适应株C-85473为骨架，删除免疫逃逸基因SH，插入RSV-F外源基因与GFP报告系统，单剂即可在呼吸道共表达两种融合蛋白，模拟自然感染却致病力减弱。研究者先在静态培养中比较Vero与LLC-MK2细胞，发现无血清Vero体系病毒产量高2.5倍，总收获滴度达2.9×10⁶ TCID₅₀/mL；连续六代全基因组测序仅检出7个低频错义突变，无一落入已知的pre-F中和表位，单抗Palivizumab与HMPV24染色证实双抗原稳定表达，遗传稳定性符合GMP要求。

疫苗效力在高度易感棉鼠模型得到全面验证：动物经两剂鼻内免疫后，血清中HMPV与RSV A/B三型中和抗体滴度分别攀升至7.2–8.1 log₂，IgG水平提高近4倍；攻毒第5天，肺和鼻甲病毒载量均降至检测限以下，而灭活疫苗组仍检出10⁴–10⁵ PFU/g病毒。病理评分显示，Metavac®-RSV未出现1960年代灭活RSV疫苗导致的嗜酸性免疫增强，Th2细胞因子IL-4/13显著低于灭活组，仅见Th1型IFN-γ与趋化因子MIP-1α轻度上升，提示黏膜免疫优势且安全窗口充足。

为实现工业化，团队在2 L一次性搅拌罐生物反应器内完成工艺放大。采用微载体+无血清Vero体系，系统优化MOI、胰酶浓度与通气策略：MOI 0.01、半量换液、每日0.5 μg/mL胰酶、40%溶氧由微孔sparger维持，4天后上清滴度达2.48×10⁷ TCID₅₀/mL，比静态培养提升1.8 log；电镜显示颗粒直径更小且均一，有利于下游纯化。重建人鼻黏膜模型进一步证实，生物反应器产物仍可高效感染纤毛上皮并共表达RSV-F与HMPV-M基因，功能活性无衰减。

作者指出，鼻喷减毒活疫苗兼具“黏膜+细胞+体液”三重免疫，尤其适用于RSV与HMPV均高发的婴幼儿，可避免肌注mRNA或蛋白疫苗的冷链与针刺难题。Metavac®-RSV的生产平台直接采用已获批疫苗的Vero细胞，工艺路径清晰，CMC资料可快速对接欧美监管。下一步将开展幼龄棉鼠与灵长类毒理/攻毒研究，并评估单剂程序及与常规疫苗的联合免疫，为Ⅰ期儿科临床试验铺平道路。

随着全球多国在新冠后遭遇RSV/HMPV反弹，一款可快速部署、成本亲民的双价鼻喷疫苗将成为公共卫生“百搭牌”。正如通讯作者Rosa-Calatrava所言：“让疫苗去适应儿童，而不是让儿童适应疫苗。” Metavac®-RSV的进阶之路，或将改写每年百万住院患儿的命运。

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参考文献：https://doi.org/10.1038/s41541-025-01231-9