研究背景

多杀性巴氏杆菌引发的禽霍乱传染性强，致禽类败血症、高死亡率，重创 poultry 产业。现有疫苗存短板：灭活疫苗需优质佐剂增强免疫，商业弱毒苗（G190E40）保护率低。Gel 01水凝胶佐剂稳定且能强化免疫，研究先明确四川 Pm 流行基因型，再评估其佐剂疫苗的保护效力。

关键突破

四川地区禽Pm基因型鉴定

为明确四川地区禽多杀性巴氏杆菌（Pm）的流行基因型，研究对2007-2022年从该地区poultry场分离、保存的16株Pm进行基因型鉴定，先通过16SrRNA和KMT1基因PCR扩增及测序分析，确认这16株细菌均为Pm，再利用针对荚膜基因型（A-F）和LPS基因型（L1-L8）的特异性引物进行多重PCR检测，结果显示所有菌株均扩增出与A型荚膜对应的1044bp片段及与L1型LPS对应的1307bp片段，与A:L1基因型的标准株PmC48-1完全匹配，最终证实2007-2022年四川地区禽Pm的优势基因型为A:L1（图2）。

疫苗制备与基础性能

选2022年分离的Pm-16为种子株（LD50=12CFU），经0.1%甲醛灭活后，分别与Gel 01、氢氧化铝、蜂胶佐剂混合，制成灭活疫苗；商业弱毒苗（G₁₉₀E₄₀）为对照。

安全性测试中，将三种灭活疫苗分别以2mL/只的剂量皮下注射14日龄健康鸡，连续观察7天，所有鸡均7天无死亡、无局部炎症；稳定性测试显示，Gel 01疫苗4℃储存不分层，氢氧化铝、蜂胶疫苗24小时分层但摇匀后可恢复，均稳定6个月以上。此外，无菌性测试证实，将三种疫苗接种于含5%小牛血清的TSA培养基，37℃培养7天均无细菌或真菌生长。

疫苗免疫保护效果

为评估疫苗的免疫保护效果，研究将60只14日龄健康鸡分为6组，其中Gel 01佐剂灭活疫苗组、氢氧化铝佐剂灭活疫苗组、蜂胶佐剂灭活疫苗组及商业弱毒苗（G190E40）组均在15日龄和30日龄时于颈部或背部皮下注射0.5mL对应疫苗进行首免和加强免疫，对照组和攻毒组同期注射0.5mL无菌生理盐水，45日龄时除对照组外，其余各组均用5LD₅₀的Pm-16菌株进行攻毒并连续观察7天；攻毒结果显示，攻毒组鸡在攻毒后1天开始死亡，3天内全部死亡，而疫苗组中Gel 01佐剂灭活疫苗组保护率达80%，氢氧化铝佐剂和蜂胶佐剂灭活疫苗组保护率均为70%，商业弱毒苗组保护率仅为50%（图3）。

血清抗体水平检测显示，Gel 01佐剂灭活疫苗组的抗体水平最高，显著高于其他三种疫苗组，抗体升速也更快（图4）。

病理观察显示，攻毒后，Gel 01组鸡肝、肺等器官无明显坏死、出血，病理评分最低；氢氧化铝、蜂胶组有轻微损伤，商业弱毒苗组损伤更明显（图5、6）。

结论与展望

研究证实四川禽Pm优势基因型为A:L1，Gel 01佐剂灭活疫苗在保护率、抗体诱导及病理保护上均优于传统佐剂疫苗与商业弱毒苗，是优质禽霍乱疫苗候选。未来可将Gel 01佐剂用于传染性支气管炎病毒等其他禽病灭活疫苗研发，还可结合基因工程技术，融入高免疫原性蛋白进一步提升疫苗效力，推动禽类疫病防控升级。

参考文献：

Chen J, Sun Y, Hu Y, et al. Evaluation of the immunoprotective effect of gel 01 hydrogel inactivated vaccine against Pasteurella multocida infection in chickens[J]. Microbial Pathogenesis, 2025, 209: 108027.