西班牙、英国等多国科研团队在《Frontiers in Veterinary Science》发布了一项针对山羊结核病诊断与疫苗接种的核心矛盾取得关键进展的重要研究。该研究证实，ESAT-6、CFP10、EspC三种定义抗原可有效消除疫苗对诊断的干扰，而鼻内接种BCG及异源加强接种策略展现出兼顾免疫效力与诊断特异性的应用潜力，为山羊结核病防控提供了新方案。

行业痛点亟待破解，疫苗与诊断矛盾突出

图 1 研究设计流程图

山羊结核病是由结核分枝杆菌复合群（MTBC）引起的慢性人畜共患病，不仅给欧洲及发展中国家的山羊养殖业带来沉重经济损失，还存在公共卫生传播风险。目前主流防控依赖"检测-扑杀"策略，但现有疫苗（如BCG）会干扰结核菌素（PPD）基诊断试验，导致无法区分接种动物与感染动物，极大限制了疫苗的推广应用。

同时，新型热灭活牛分枝杆菌（HIMB）疫苗虽展现出与BCG相当的保护效力，但不同接种途径对诊断的影响尚不明确，开发兼具有效性与兼容性的疫苗-诊断组合方案成为行业迫切需求。

多维度试验验证，定义抗原成诊断"利器"

研究团队选取30只4月龄穆尔西亚-格拉纳达山羊仔，设计了五种接种方案：鼻内接种BCG、鼻内接种HIMB（含或不含黏膜佐剂）、同源加强接种（皮下HIMB+鼻内HIMB）、异源加强接种（皮下BCG+鼻内HIMB），并设置未接种对照组。在接种后14周开展皮肤试验、γ干扰素释放试验（IGRA）和抗体检测，重点评估ESAT-6、CFP10、EspC组成的定义抗原诊断效果。

结果显示，传统PPD基诊断中，鼻内BCG组和两种加强接种组的阳性率极高（低阈值下可达100%），存在严重诊断干扰；而采用定义抗原（DST-F融合蛋白或DIGRA-C抗原cocktail）时，所有组均无或仅有极少数动物呈阳性，成功解决了疫苗诱导的诊断干扰问题。

接种策略优化升级，鼻内BCG表现亮眼

图 2 两种IGRA试剂盒检测不同接种组山羊γ干扰素应答对比图

在免疫效力方面，单剂鼻内接种BCG诱导的PPD特异性迟发型超敏反应和IFN-γ应答，与两种加强接种策略效果相当，且显著优于鼻内接种HIMB组。这表明鼻内BCG接种不仅能避免诊断干扰，还能引发强效系统细胞免疫，为替代传统皮下接种提供了新选择。

图 3 不同接种组山羊在第14周和第16周针对MPB83抗原的IgG抗体应答对比图

抗体检测结果显示，同源加强接种组在接种后14周的MPB83特异性IgG阳性率达100%，而异源加强接种组在皮肤试验后抗体水平显著提升，与同源加强组相当，两种加强策略均展现出优异的体液免疫诱导能力。

技术突破意义深远，助力产业防控升级

该研究的核心突破在于明确了定义抗原与优选接种策略的协同作用：ESAT-6、CFP10、EspC组合可精准区分山羊"接种状态"与"感染状态"，而鼻内BCG接种和BCG+鼻内HIMB异源加强策略，能在保障免疫效力的同时，兼容新型诊断方法。

研究人员指出，这些发现为山羊结核病防控提供了一体化解决方案，未来可通过推广新型诊断试剂与优化接种方案，实现"疫苗接种+精准诊断"的协同防控，既减少经济损失，又降低公共卫生风险。后续研究将进一步开展攻毒试验，验证该组合方案的实际保护效果，推动技术落地应用。

原文链接：DOI 10.3389/fvets.2024.1524461