疙瘩皮肤病（LSD）是由疙瘩皮肤病病毒(LSDV)引起的烈性传染病，主要感染牛类动物。患病动物会出现发热、皮肤结节、淋巴结肿大等症状，严重时会导致产奶量下降、不孕甚至死亡，对畜牧业造成巨大经济损失。近年来，该病毒从非洲、中东地区快速扩散至亚洲，印度作为畜牧业大国，面临着严峻的防控压力。

图 1 疙瘩皮肤病病毒（LSDV）反向末端重复序列（ITR）区域的结构示意图

传统LSD疫苗存在一个技术短板，接种后动物产生的免疫反应与自然感染极为相似，常规血清学检测无法区分二者，这给疫情监测和无疫区认证带来了极大困难。印度此次获批的兰契株弱毒活疫苗，突破了传统疫苗的技术瓶颈。该疫苗株的反向末端重复（ITR）区域存在801个核苷酸的缺失，导致ORF003/ORF154基因功能丧失。这一基因特征成为研发区分检测技术的核心靶点。

研究团队通过分子克隆技术，将野毒株LSDV的ORF154基因插入pET28a载体，在大肠杆菌中成功表达并纯化出约28 kDa的重组蛋白。以此蛋白为抗原，团队优化建立了ELISA检测方法，确定最佳抗原包被浓度为500 ng/孔、血清稀释比例为1:50，阳性判定临界值为22.63%。

经临床样本验证，该检测方法的灵敏度高达95.77%，特异性达95.42%。感染野毒株的动物血清会与ORF154重组蛋白发生特异性反应，而接种兰契株疫苗的动物血清则无此反应，实现了“感染”与“免疫”的精准区分。

这一成果的问世，标志着兰契株疫苗成为全球首款具备DIVA特性的LSD疫苗。配套的ORF154-DIVA ELISA检测方法，能够为疫病监测、疫苗效果评估和无疫区申报提供可靠的技术依据，对推动LSD的防控与根除具有重要意义。

值得关注的是，疫苗研发与检测技术的突破，离不开基础生物试剂的支撑，其中菌苗培养基的质量尤为关键。菌苗培养基作为病毒培养、重组蛋白表达的核心载体，其成分稳定性、营养配比精准度直接影响病毒增殖效率、蛋白表达量与活性，进而决定疫苗生产的产能、纯度及检测方法的灵敏度。优质的菌苗培养基能够为微生物生长提供适宜的营养环境，减少杂菌污染风险，保障疫苗研发与生产的稳定性和安全性，是畜禽疫病防控体系中不可或缺的基础环节。

在菌苗培养基领域，环凯生物凭借多年技术积淀，为畜牧兽医领域提供了高品质的解决方案。环凯生物菌苗培养基严格遵循行业标准，采用精准配比的营养成分，可满足LSDV等病毒培养、重组蛋白表达等多种应用场景需求，具备稳定性强、重复性好、污染率低等优势，能够为疫苗研发机构、生物制品企业提供可靠的基础支撑。从实验室研发到规模化生产，环凯生物始终以严苛的质量控制体系，保障每一批产品的性能一致性，助力全球畜禽疫病防控技术创新与产业升级，为畜牧业健康发展筑牢生物安全防线。

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2025.115200