细胞培养源FAdV-8a/8b/11三价油佐剂疫苗的免疫优化：高剂量依赖性效应与加强免疫对IBH防控的关键作用

背景知识

禽腺病毒（Fowl Adenovirus, FAdV）是家禽业的重要病原体，其中包涵体肝炎（Inclusion Body Hepatitis, IBH）由FAdV D种和E种引起，导致肉鸡和蛋鸡出现急性病毒感染，死亡率可达2%至30%，造成严重的经济损失。IBH主要由FAdV血清型2、8a、8b和11引起，近年来在包括埃及在内的全球范围内发病率不断上升。该病毒可通过垂直传播（经卵黄囊等）和水平传播（污染器具、饲料或水）扩散。尽管已有多种形式的疫苗（灭活、减毒活、重组等），但灭活疫苗仍是最常见的控制手段。此外，相比传统的鸡胚培养法，细胞培养技术在生产FAdV疫苗方面具有明显优势，包括能诱导更早和更高的抗体反应、生产周期短、批次间差异小，且不易引入外源因子。

研究方法

本研究旨在制备并评估一种含FAdV-8a、8b和11（FAdV-D）的三价油佐剂灭活疫苗的免疫原性。研究团队首先从埃及Sharqia省疑似感染鸡的肝脏样本中分离病毒，通过针对hexon基因L1区的PCR扩增和DNA测序确认病毒血清型。病毒在原代鸡胚肝细胞（CEL）中培养，测定TCID50滴度（FAdV-8a和8b为10⁹/mL，FAdV-D为10⁸/mL）。随后使用0.2%甲醛灭活病毒48小时，确认完全灭活后，以30:70比例与矿物油佐剂乳化，制备三种抗原剂量的疫苗：10⁷、10^6.8和10^6.5 TCID50/剂。动物实验分为两部分：实验1将40只10周龄SPF鸡分为4组，分别接种三种不同剂量疫苗（G1-G4），其中G2组额外添加硫柳汞（25 μg/剂），监测6周抗体水平；实验2在首免6周后，对G1和G3组进行亚组划分，分别设置不加强、高剂量加强、低剂量加强等方案，监测加强免疫后3周的抗体动态。抗体水平通过商业ELISA试剂盒检测，并使用双因素方差分析进行统计。

图1 实验设计图

研究结果

研究成功分离鉴定了FAdV-D、8a和8b三种血清型，在CEL细胞中观察到典型的细胞病变效应（CPE），包括细胞圆缩、聚集和脱落。免疫结果显示，三种剂量的疫苗均能诱导可观的ELISA抗体滴度，但呈现明显的剂量-反应关系：高剂量组（G1，10⁷ TCID50）在6周内维持持续稳定的抗体水平，未出现急剧下降；而最低剂量组（G4，10^6.5 TCID50）的抗体反应显著较弱。添加硫柳汞的高剂量组（G2）与未添加组（G1）相比，抗体水平无显著差异，证明硫柳汞作为防腐剂安全有效，不影响疫苗免疫原性。在加强免疫阶段，仅接受高剂量加强的组别（G1-B和G3-B）表现出抗体水平显著升高，并在加强后第2-3周达到峰值；而接受低剂量加强的G3-A组未观察到抗体增强效应，未加强的G1-A组抗体则持续下降，表明加强免疫对维持高滴度抗体至关重要。

结论与意义

本研究证实，含FAdV-8a、8b和11的三价灭活油佐剂疫苗在SPF鸡中具有良好的免疫原性，其中高剂量（10⁷ TCID50）疫苗配合一次加强免疫可诱导高水平且持久的体液免疫反应，持续至少9周。该研究为IBH的防控提供了有前景的疫苗策略，特别适用于种鸡及其后代的保护。此外，研究确认了硫柳汞作为疫苗防腐剂的安全性，并强调了细胞培养技术相对于鸡胚培养在生产FAdV疫苗方面的优势，包括生产灵活性高、减少外源因子污染等。然而，研究也存在局限性，未进行攻毒试验以评估疫苗对病毒排放和传播的实际保护效力，也未评估3-6个月以上的长期免疫持续时间。

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产品链接:

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猪链球菌病疫苗培养基见https://www.bhkbio.com/show/29344.html

参考来源：Ibrahim, F.E., Shaheen, M.N.F., Maged, H. et al. Preparation and Serological Evaluation of an Inactivated Trivalent Oil Emulsion Vaccine for Avian Fowl Adenovirus (FAdV) Containing − 8a, 8b, and 11 Serotypes. Curr Microbiol 83, 147 (2026). https://doi.org/10.1007/s00284-025-04706-z