噬菌体是贯穿农场至餐桌全链条中极具潜力的抗菌剂，然而其口服抗感染效果受到消化道耐受性差的严重限制。为提升口服噬菌体的递送效率，我们合成了T4噬菌体-壳聚糖偶联物，并将其与磷脂自组装形成保护性纳米乳。我们系统考察了壳聚糖浓度对偶联效率、噬菌体在模拟胃肠道环境中的存活率及其抗菌活性的影响。结果显示，中等浓度壳聚糖（50–100 μg/mL）制备的纳米乳在胃部转运过程中对噬菌体具有最佳保护效果，相比游离噬菌体，其存活率提高了约5 log₁₀ PFU/mL。过高的壳聚糖浓度会损害噬菌体的存活与释放能力，而过低的浓度则导致组装不充分。优化后的制剂（Phage-CL-50）在肠道上皮细胞模型中展现出对侵袭性细菌和生物膜的卓越抑制效果，并实现了可逆的跨上皮转运。在小鼠实验中，Phage-CL-50显著提升了噬菌体在胃肠道的滞留时间与抗菌效能。该纳米乳策略为通过制剂优化开发高效口服噬菌体产品提供了合理路径，在食品工业领域具有广阔应用前景。

1、最优配方：壳聚糖浓度 50 μg/mL（Phage-CL-50）

2、保护效果：模拟胃液（含胃蛋白酶）中存活率提高 5 log PFU/mL

3、释放行为：缓释可控，避免突释或滞留不足

4、抗菌优势：同时清除浮游菌、胞内菌、生物膜

5、肠道穿透：可逆性打开紧密连接，可恢复屏障功能

6、体内效果：肠道滞留提高 1.6倍，细菌清除增强 16.5倍

结论： Phage-CL-50 是经优化的最优配方，兼顾保护、缓释、抗菌、穿透、安全五大性能。该平台可同时清除浮游菌、胞内菌、生物膜，突破传统噬菌体口服应用瓶颈，在小鼠模型中显著提高肠道滞留与抗菌效果，减少细菌负荷16.5倍，为畜牧业抗生素减量化与动物源性食品安全提供新工具。

参考来源：10.1016/j.foodres.2025.118114