无血清培养基：细胞培养标准化与伦理化新方向

传统脊椎动物细胞体外培养长期依赖胎牛血清（FBS），但血清存在成分不明确、批次差异大、动物伦理争议及供应不稳定等问题，严重影响实验重复性与工业化生产的稳定性。在鱼类细胞研究领域，由于缺乏成熟可控的无血清培养体系，多数细胞系仍无法脱离血清实现长期稳定培养。近期，国际研究团队以虹鳟鱼鳃细胞系 RTgill‑W1 为模型，成功开发出成分完全透明、可长期传代的无血清培养基，为鱼类细胞的无血清标准化培养提供了重要技术支撑。

图1 定制无血清培养基设计的系统方法

通过 96 孔板短周期增殖检测体系，系统筛选血清替代组分，对比基础培养基、血清对照组与无血清配方的细胞活力、增殖效率及细胞形态，验证优化后的无血清体系可维持与血清组相近的细胞状态。

研究团队以 Leibovitz L‑15 为基础培养基，系统性补充胰岛素‑转铁蛋白‑硒‑乙醇胺复合物、限定脂质、微量元素、维生素、氢化可的松及重组表皮生长因子等关键成分，构建全化学成分明确的无血清培养体系。经短周期功能验证，该配方可显著提升细胞代谢活性与细胞膜完整性，细胞形态正常，增殖表现稳定。在长期适应性培养中，细胞可稳定传代并保持良好的生长特性，为后续应用奠定基础。

图2 RTgill-W1向无血清培养基过渡的适应策略

采用逐步降低血清的驯化策略，实现 RTgill‑W1 细胞向无血清体系的稳定过渡，驯化后细胞可连续传代、冻存复苏效率高，且在 OECD 标准毒性测试中表现与血清培养细胞一致。

该无血清培养基不仅实现了鱼类细胞长期、稳定、可重复的体外培养，还满足环境毒性检测等标准化应用要求，推动细胞培养从依赖动物源血清向成分明确、过程可控、伦理友好的方向升级。随着无血清培养技术在生物医药、疫苗生产等领域的普及，国产化无血清培养基正成为行业发展的关键支撑。

立足国内无血清技术创新，广东环凯生物科技有限公司聚焦兽用生物制品领域需求，已成功推出面向兽用疫苗生产的无血清培养基系列产品，适配多种动物细胞基质，具备成分清晰、批次稳定、无动物源风险等优势，可全面满足兽用疫苗规模化、标准化生产需求。环凯生物无血清培养基的成熟应用，有效打破进口依赖，有力推动了兽用生物制品无血清培养工艺的国产化进程，为我国动物健康保障与生物产业高质量发展提供可靠的核心产品支持。

来源：A systematic approach towards long-term, serum-free cultivation of fish cells with the RTgill-W1 cell line as example. https://doi.org/10.1016/j.namjnl.2025.100008