碱性成纤维细胞生长因子：兔脂肪间充质基质细胞无血清培养的新突破

 本研究成功开发了一种以碱性成纤维细胞生长因子为核心的无血清培养体系，使兔脂肪来源间充质基质细胞在脱离胎牛血清依赖后仍能保持完整的干细胞特性、多向分化潜能及表面标志物表达，为兽医再生医学中标准化、可追溯的干细胞制备提供了关键技术支撑。

在生长因子筛选阶段，研究者系统评估了碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子-β1和胰岛素样生长因子-1单独或联合使用的效果。实验结果明确显示，唯有碱性成纤维细胞生长因子能够有效支持兔脂肪间充质基质细胞的存活与扩增，其余生长因子无论单独添加还是组合使用均未能展现促增殖活性。尽管无血清培养条件下的细胞扩增速率仍略低于传统胎牛血清培养体系，但碱性成纤维细胞生长因子已展现出最佳的替代潜力，因此被确定为后续研究的核心添加成分。

形态学观察表明，经无血清培养基联合碱性成纤维细胞生长因子培养的细胞保持了典型的成纤维细胞样贴壁生长形态，与胎牛血清培养组在显微镜下难以区分。这种形态稳定性提示无血清环境并未诱导细胞发生异常分化或去分化现象。进一步的分子水平分析证实，两组细胞在干性相关基因表达上高度一致，核心转录因子基因的表达水平未见显著差异，表明碱性成纤维细胞生长因子足以维持细胞的干性状态。衰老相关标志物的检测结果同样显示两组间无统计学差异，说明无血清培养并未加速细胞衰老进程，碱性成纤维细胞生长因子在延缓细胞老化方面发挥了积极作用。

流式细胞术免疫表型分析揭示了更为精细的差异。虽然两组细胞均高表达间充质干细胞阳性标志物且低表达造血系标志物，符合国际细胞治疗学会的基本要求，但无血清培养组的细胞在多个黏附相关分子上呈现显著上调。这种表达增强可能反映了细胞在无血清环境下的代偿性适应机制，通过增加黏附分子表达来弥补血清中附着因子的缺失，从而维持正常的细胞贴壁与信号传导功能。造血系标志物在两组中均维持极低水平，进一步确认了培养体系未诱导细胞向造血谱系偏移。

图1. 生长因子筛选以确定兔脂肪来源间充质基质细胞所需的生长因子

三系分化潜能的评估是验证干细胞功能完整性的金标准。经过成骨、成脂和成软骨定向诱导后，两组细胞均展现出典型的分化表型。成骨诱导后可见大量钙结节沉积，成脂诱导后出现丰富的脂滴积累，成软骨诱导后糖胺聚糖基质呈阳性染色。基因表达分析进一步量化了分化特异性标志物的诱导表达，结果显示无血清培养组与胎牛血清组在各谱系关键转录因子和结构蛋白基因的表达水平上均无显著差异。这一发现具有重要实践意义，证明无血清培养不仅维持了细胞的形态和分子特征，更保留了其核心的功能可塑性。

综合上述结果，该研究确立的无血清培养体系在多个维度上成功模拟甚至部分超越了传统胎牛血清培养的效果。碱性成纤维细胞生长因子的关键作用体现在其作为有丝分裂原促进细胞分裂、通过特定信号通路阻止过早分化、以及调控衰老相关基因表达以维持细胞活力。尽管长期传代稳定性仍有待后续研究验证，但当前数据已充分支持该体系在临床应用前的细胞扩增阶段具有实际价值。这一成果不仅填补了兔源间充质干细胞专用无血清培养基的研究空白，更为跨物种干细胞培养体系的开发提供了重要参考，推动兽医再生医学向标准化、可控化的细胞治疗时代迈进。

来源：Kuncorojakti S, Aswin A, Diyantoro D, et al. Basic fibroblast growth factor preserves rabbit adipose-derived mesenchymal stromal cells in serum-free culture. J Vet Sci. 2026;27(3):e36. doi:10.4142/jvs.25154