口服疫苗防控非洲猪瘟又进一步：双基因缺失候选疫苗在野猪中显示保护效果

非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种高度接触性、致死性猪病，可感染家猪和野猪。该病发病急、传播快，急性病例常表现为高热、食欲下降、出血性病变和快速死亡，致死率可高达100%。由于病毒能够在肉制品、动物副产品及环境中较长时间存活，加之野猪种群活动范围广、监测和干预难度大，非洲猪瘟的防控长期面临较大挑战。

近年来，非洲猪瘟在欧洲、亚洲、非洲及美洲部分地区持续扩散，野猪在病毒维持和跨区域传播中被认为具有重要作用。传统防控措施主要依赖扑杀、封锁、消毒和生物安全管理，这些手段在家猪养殖场中较为有效，但在野外环境中难以完全阻断病毒循环。因此，针对野猪的口服疫苗被认为是未来非洲猪瘟综合防控中的重要方向之一。

本研究关注的候选疫苗名为Lv17/WB/Rie1-ΔCD，来源于此前发现的自然弱毒非洲猪瘟病毒株Lv17/WB/Rie1。原始弱毒株曾在野猪和家猪中显示较好的保护效果，但仍存在一定安全性顾虑，例如个别情况下可能出现发热、精神沉郁或慢性病程。因此，研究团队进一步对其进行遗传改造，删除EP402R/CD2v和 EP153R两个基因，并用绿色荧光蛋白GFP替代相关区域，以降低血吸附能力并建立可用于DIVA诊断的分子标记。

DIVA是“区分感染动物与免疫动物”的重要技术概念。对活疫苗而言，若接种动物和自然感染动物在常规抗体检测中无法区分，疫病监测和贸易管理会受到影响。该候选疫苗删除了EP153R基因，因此接种动物理论上不会产生针对该蛋白的抗体，而自然感染动物则可产生相关抗体。研究中联合使用p72抗体检测、eGFP抗体检测和pEP153R ELISA，实现了对疫苗免疫反应与感染反应的区分，为后续疫苗应用中的监测管理提供了技术基础。

实验共使用18头3月龄雌性野猪，分为两个免疫组和一个对照组。第一组接受一次高剂量口服免疫，剂量为10⁴ TCID₅₀；第二组先接受10² TCID₅₀低剂量口服免疫，30天后再接受10⁴ TCID₅₀再次口服暴露；对照组不接种疫苗。随后，所有相关动物均接受高毒力基因Ⅱ型Arm07毒株攻击，以评价疫苗保护效果。

图1 野猪Lv17/WB/Rie1-ΔCD疫苗候选者的动力学

从安全性看，两种免疫方案在接种阶段均未引起明显不良反应。部分动物出现短暂、低程度发热，但未观察到严重临床症状。血液生化指标方面，研究检测了肝功能、肾功能、炎症和代谢相关指标，包括AST、ALT、肌酐、尿素、白蛋白、总蛋白、葡萄糖和 C 反应蛋白等。结果显示，免疫本身未造成明显肝肾毒性或持续性炎症反应，提示该候选疫苗在实验条件下具有较好的耐受性。

从免疫效果看，一次高剂量口服组中，6头动物有5头产生抗体反应，平均在接种后约10天出现血清转阳；低剂量—高剂量再次暴露组中，第一次低剂量免疫后仅少数动物产生抗体，但第二次口服暴露后全部动物在攻击前完成血清转阳。这说明，野猪口服免疫可能受摄入量、黏膜暴露程度和个体差异影响，多轮投喂或再次暴露有助于提高有效免疫覆盖率。

攻毒结果是研究的核心。所有成功免疫并产生抗体反应的动物均在高毒力 Arm07毒株攻击后存活。一次高剂量口服组保护率为83.33%，低剂量—高剂量再次暴露组保护率为100%，总体保护率达到90%。相比之下，未免疫对照组全部出现严重非洲猪瘟相关临床症状，并在攻毒后6—7天达到人道终点。血液和组织qPCR结果也显示，免疫动物体内病毒基因组载量明显低于对照组，文献摘要中指出血液和组织中的病毒基因拷贝数较对照组降低超过10³倍。

值得注意的是，两次口服暴露组不仅存活率更高，而且攻毒后临床症状更轻、血液病毒载量更低。研究者认为，这并不一定代表经典意义上的“初免—加强免疫”，因为第一次低剂量口服并未在所有动物中稳定建立免疫；更准确地说，这是一种“再次暴露”效应，即通过第二轮口服给药提高疫苗真正进入并诱导免疫反应的概率。这一点对野外诱饵疫苗投放具有现实意义，因为自由活动野猪对诱饵的摄入并不均一。

总体来看，Lv17/WB/Rie1-ΔCD是一种具有潜力的非洲猪瘟口服候选疫苗。它在自然弱毒株基础上进一步删除两个与毒力和诊断标记相关的基因，兼顾了保护效果、安全性提升和DIVA监测需求。该研究为野猪非洲猪瘟口服免疫提供了新的实验依据，也支持多基因缺失策略在非洲猪瘟活疫苗研发中的应用。

不过，该候选疫苗距离实际应用仍有一段距离。研究样本量有限，实验在严格生物安全条件下完成，尚不能直接等同于大规模野外应用。后续仍需系统评估其在不同年龄、不同生理状态动物中的安全性，尤其是妊娠母猪等敏感群体；同时还需验证疫苗株的遗传稳定性、传播风险、环境存活特征以及诱饵投放条件下的实际免疫覆盖率。只有在保护效果、安全边界和监测体系均被充分验证后，口服疫苗才可能真正成为非洲猪瘟野猪防控的重要工具。

参考来源：Barasona JA, Kosowska A, González-García G, Díaz-Frutos M, Franzoni G, Nicolussi P, Porras N, Sánchez-Segovia M, De Antonio-Gómez D, Rueda P, Barroso-Arévalo S. A dual-gene-deleted ASFV Lv17/WB/Rie1-ΔCD candidate administered orally to wild boar confers DIVA-compatible protection against virulent challenge. Vet Q. 2026 Dec 31;46(1):2649573. doi: 10.1080/01652176.2026.2649573. Epub 2026 Mar 26. PMID: 41888028; PMCID: PMC13023007.