食品中空肠弯曲菌的RAA-Exo-Probe和RAA-CRISPR/Cas12a快速检测方法的建立

通常用于基因编辑的目的，成簇的规律间隔的短回文重复（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats, CRISPR）相关（Cas）蛋白识别核酸的能力可用于快速扩增，即时检验（Point of Care Testing, POCT）方法用于空肠弯曲菌检测。在Cas12a检测系统，例如，产生含有与目标DNA互补的引导序列的CRISPR RNA（crRNA）。当crRNA与Cas12a蛋白结合后，Cas12a/crRNA复合物可与靶序列结合并无差别地切割ssDNA。生成的报告ssDNA会被切割，从而发出荧光信号，可用于核酸检测方法。

由于具有高的靶标识别特异性，CRISPR/Cas12a方法可以与RAA相结合，作为空肠弯曲菌的新型终点检测系统。基于此，我们成功开发了一种用于检测空肠弯曲菌的RAA方法，该方法使用探针进行信号检测。CRISPR/Cas12a检测系统也被设计作为一种新的信号传感方法用于空肠弯曲菌的RAA检测。虽然目前基于RAA-exo-probe的空肠弯曲菌检测方法的文献报道较少，且尚未见基于RAA-CRISPR/Cas12a的空肠弯曲菌检测方法的报道，但本研究表明这两种方法对食品中空肠弯曲杆菌的检测均具有较高的灵敏度和特异性

图1 检测原理示意图

参考文献：Development of Recombinase-Aided Amplification (RAA)-Exo-Probe and RAA-CRISPR/Cas12a Assays for Rapid Detection of Campylobacter jejuni in Food Samples