Vero 细胞‘悬浮化+无血清化’再进一程:rVSV 载体疫苗在生物反应器中实现高滴度生产
图 在 1 升生物反应器中,以分批模式培养适应悬浮培养的 Vero 细胞在 IHM03(a)和 MDXK(b)培养基中的细胞生长情况
为何重要:Vero 是“疫苗制造常青树”,但贴壁平台限制放大
文章指出,Vero 是病毒疫苗制造中使用最广泛的连续细胞系之一,但传统贴壁培养需要依赖培养表面(滚瓶、微载体等),规模化路径相对受限;相比之下,悬浮培养通常更有利于工艺放大与可复制性。
工艺亮点:从“专有培养基”迁移到“商业无血清培养基”
研究团队强调:此前该悬浮 Vero 细胞系只能在“专有培养基”中培养;本工作将适配与反应器培养进一步扩展到商业无血清培养基,并配合小规模筛选与参数优化,形成可用于反应器放大的生产模板。
关键结果:三类 rVSV 载体在反应器内实现高滴度
在生物反应器条件下,三种 rVSV 载体/候选疫苗均能复制到较高滴度(TCID_{50}/mL):
· rVSV-ZEBOV:3.87 × 10⁷
· rVSV-HIV:2.12 × 10⁷
· rVSV_{Ind}-msp-S_F-Gtc:3.59 × 10⁹
同时,作者还比较了不同载体的细胞比生产力,并用“总颗粒/感染性颗粒比值”来评估产物质量(即不仅看滴度,也看感染性占比)。
对工艺开发的启示:平台化思路比“单病毒优化”更值钱
这项工作提供了一个偏“平台工艺”的范式:同一套悬浮 Vero + 无血清商业培养基 + 反应器生产框架,可以支持多条 rVSV 载体管线的制造探索。对需要在不同疫苗项目间复用产线、缩短 CMC 周期的团队来说,这类平台化验证通常比“只优化一个毒株”更具迁移价值。
关键发现
· 悬浮适配 Vero 细胞可进一步迁移到商业无血清培养基并用于反应器生产。
· rVSV-ZEBOV、rVSV-HIV 与 rVSV_{Ind}-msp-S_F-Gtc 在反应器中达到 10⁷–10⁹ TCID_{50}/mL 量级滴度。
· 质量评估不仅看滴度,还通过“总颗粒/感染性颗粒”比值辅助判读产物状态。
补充说明:环凯也有类似“好用”的培养基选择
如果你在做病毒学/疫苗相关细胞培养体系的搭建,除了海外品牌的商业无血清培养基外,国内供应链也在完善。例如,环凯推出了细胞培养基系列产品,其中 M199 等基础培养基被其介绍为常用于病毒学与疫苗生产相关应用;在研发或工艺摸索阶段,这类基础培养基也常作为构建低血清/无血清体系(配合添加剂与工艺参数)的起点选择之一。
参考文献:
Kiesslich, S., Kim, G. N., Shen, C. F., Kang, C. Y., & Kamen, A. A. (2021). Bioreactor production of rVSV‐based vectors in vero cell suspension cultures. Biotechnology and Bioengineering, 118(7), 2649–2659. https://doi.org/10.1002/bit.27785
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