H9N2亚型禽流感病毒持续威胁全球家禽养殖业，不仅导致鸡群产蛋率下降、死亡率升高，造成巨额经济损失，还存在禽传人及重组引发新型流感的潜在风险，疫苗防控成为关键手段。传统鸡胚培养疫苗存在供应受限、易受外源污染等弊端，制约了防控效能提升。而华东理工大学研究团队已成功构建高效MDCK悬浮细胞疫苗生产平台，为H9N2流感疫苗工业化量产提供了全新解决方案。

核心突破：MDCK细胞实现无血清悬浮高效培养

图 1 MDCK细胞在无血清培养基中悬浮培养的适应性传代

研究团队针对传统贴壁MDCK细胞培养效率低、依赖血清的问题，通过技术优化将贴壁MDCK细胞成功适配为无血清悬浮生长模式。在批次培养中，该悬浮细胞可实现高密度增殖，细胞浓度最高可达12×10⁶ cells/mL，为后续病毒高效扩增奠定了基础。相较于传统贴壁培养需依赖微载体、操作复杂的弊端，无血清悬浮培养无需离心、洗涤等繁琐步骤，大幅简化了生产流程，同时避免了血清带来的批次差异大、外源病原体污染等风险，显著提升了生产安全性与稳定性。

工艺优化：病毒滴度创新高，适配工业化量产

图 2 MDCK细胞在无血清培养基体系下H9N2病毒感染参数的优化

为进一步提升H9N2病毒产量，研究团队对疫苗生产关键环节进行系统优化：在感染时机采用培养基更换策略，同时精准调控感染复数（MOI）、感染时细胞浓度等核心参数；在感染阶段测试多种补料策略，最终确定1:2培养基稀释补料方案，成功获得血凝效价高达13 log₂（HAU/50 μL）的H9N2病毒液，病毒增殖效率大幅提升。

值得关注的是，团队在生物反应器中验证了优化工艺的规模化适配性。结果显示，生物反应器内MDCK细胞生长状态与病毒产量均与摇瓶培养相当，细胞特异性病毒产量可超过14000个病毒粒子/细胞，证明该生产平台可稳定放大至工业化生产规模，有效解决传统鸡胚疫苗产能受限的痛点。

免疫效力验证：诱导高滴度中和抗体，保护效果可靠

疫苗的核心价值在于免疫保护效果。研究团队将生物反应器收获的H9N2病毒经纯化后制备成疫苗，通过鸡体免疫试验验证其效力。结果显示，该MDCK细胞源疫苗可有效诱导鸡群产生高滴度中和抗体，能够针对性抵御H9N2流感病毒感染，免疫保护效果达到防控需求，为家禽临床应用提供了坚实的效力支撑。

行业价值：推动疫苗生产技术革新，强化疫病防控屏障

该研究构建的MDCK悬浮细胞生产平台，相较于传统鸡胚培养和贴壁细胞培养，具备三重显著优势：一是生产效率更高，高密度细胞培养与优化工艺大幅提升病毒滴度，适配工业化量产；二是安全性更优，无血清体系彻底规避血清相关污染风险，纯化后宿主蛋白、DNA去除率更易达标；三是生产流程更简化，无需微载体，操作便捷且成本可控。

该研究成果打破了传统疫苗生产技术的局限，为H9N2流感疫苗生产提供了高效、安全、可规模化的全新路径。随着该技术的落地应用，有望提升H9N2流感疫苗的供应能力与防控效果，同时为其他亚型流感及禽病疫苗的细胞培养技术研发提供重要借鉴，进一步推动家禽疫病防控体系升级，助力养殖业高质量发展。

值得一提的是，疫苗生产技术的落地离不开优质培养基的支撑，广东环凯生物研发的多款动物细胞培养基，可精准适配MDCK、Vero等疫苗生产常用细胞的培养需求。其无血清培养基采用植物源或酵母源营养成分优化配方，能有效支持细胞高密度悬浮生长，保障病毒高效增殖，同时凭借严格的质量控制体系确保批次稳定性，降低外源污染风险，为MDCK悬浮细胞疫苗生产平台的工业化应用提供了可靠的国产培养基选择。

参考文献：https://doi.org/10.1186/s40643-020-00352-4