植物乳杆菌P9治疗年轻人慢性腹泻

慢性腹泻是一种常见的功能性胃肠道疾病，影响全球 3-20% 的人口。它被定义为每天超过 3 次排便或稀便，持续至少 4 周。慢性腹泻的常见原因包括功能性障碍，如肠易激综合征伴腹泻 （IBS-D） 和功能性腹泻，导致受影响的个体出现许多临床和社会问题。目前，慢性腹泻的治疗选择包括洛哌丁胺、地芬诺酯、可乐定、可待因、吗啡制剂和抗胆碱能药物。然而，这些药物会引起副作用，例如便秘、恶心、呕吐、腹胀和进一步的腹泻发作。此外，人们担心抗生素的耐药性和与它们的使用相关的持久性。因此，管理慢性腹泻会带来很大的困难。

2024年8月9日，内蒙古农业大学农业农村部乳制品加工重点实验室张和平团队在国际期刊《Nature Communications》在线发表题为“Lactiplantibacillus plantarum P9 for chronic diarrhea in young adults: a large doubleblind, randomized, placebo-controlled trial”的研究性论文。这项研究的结果支持使用益生菌治疗年轻人的慢性腹泻。然而，缺乏血液参数评估和较短的干预期代表了本研究的局限性。

图 1：说明受试者流程的 CONSORT 图

在28天的干预后，P9组的平均（标准差）腹泻症状严重程度评分与安慰剂组相比显著降低了20.0%（P9组和安慰剂组分别为1.2[0.8]和1.5[0.9]，P=0.050；补充表2）。PP分析也表明，与安慰剂组相比，P9组的平均（标准差）腹泻症状严重程度评分显著降低，降低了21.4%（P9组和安慰剂组分别为1.1[0.7]和1.4[0.8]，P=0.048）。同样，在PP人群中，与安慰剂组相比，P9干预在第28天导致P9组的平均（标准差）粪便硬度评分显著降低（P9组和安慰剂组分别为4.7[0.7]和4.9[0.6]，P=0.050；）。然而，在ITT分析中，P9干预后粪便硬度没有观察到显著改善（第28天P9组和安慰剂组的平均[SD]粪便硬度评分分别为4.7[0.7]和5.0[0.6]，P=0.052；）。尽管在干预期间安慰剂组的这些评分也有所降低，但P9组在第28天的降低幅度明显大于安慰剂组（P<0.01），这表明在非益生菌组中观察到的变化可能归因于安慰剂效应。在ITT和PP分析中，干预期间P9组和安慰剂组在排便频率、急便、抑郁、焦虑和压力评分方面没有观察到显著差异（P>0.05）。这些结果表明，P9干预适度但显著地减轻了腹泻症状。

通过宏基因组测序在三个时间点（第0、28和42天）对169名患者的粪便微生物群进行了分析。在任何时间点，P9组和安慰剂组之间的α多样性（Shannon指数和Simpson指数，P>0.05）没有观察到显著差异。然而，β多样性分析（通过主坐标分析和adonis测试评估）揭示了P9组和安慰剂组在第28天（R²=0.015，P=0.012）和第42天（R²=0.014，P=0.018）的粪便微生物群结构存在显著差异。

β多样性分析表明，在第0、28和42天，P9组和安慰剂组之间的整体噬菌体组没有显著差异。同样地，在第0和42天，两组之间的噬菌体组α多样性没有显著差异（P>0.05），但在第28天，P9组患者粪便噬菌体组的Simpson多样性指数在数值上较低，但与安慰剂组相比没有达到统计学显著性（P=0.056）。有趣的是，观察到肠道细菌微生物群的Shannon指数与噬菌体组之间存在显著的正相关（R=0.928，P=9.21e-21）。这些发现表明肠道噬菌体组与其细菌宿主之间存在强大的协同作用。

在629个SGBs中总共发现了26170个编码CAZyme的基因（补充数据1），其中大多数基因编码糖苷水解酶家族（GHs，14598个基因），其次是糖基转移酶（GTs，6108个基因）、碳水化合物酯酶（CEs，2726个基因）、碳水化合物结合模块（CBMs，1690个基因）、多糖裂解酶（PL，810个基因）和辅助活性（AAs，238个基因）。此外，对P9组和安慰剂组之间编码CAZyme的亚家族进行比较分析显示，在第28天或第42天，有15个亚家族在P9组中富集，包括GHs、CBMs、糖基转移酶、PLs和CE16。这些结果表明，服用P9可以导致肠道微生物群中编码CAZyme的基因富集，可能有助于扩大碳水化合物的利用能力。

在第28天和第42天，共鉴定出21种显著差异的代谢物。值得注意的是，这些代谢物在基线时两组之间没有显著差异，但仅在P9干预期间或之后变得差异丰富。在益生菌干预后，咖啡酸、牛磺酸、3-羟基戊酸、二十六烷酸和蜡酸显著富集于P9组（P<0.05；）。进一步使用双尾Pearson相关分析探讨了差异丰富的代谢物与腹泻临床指标之间的关联。有趣的是，结果表明3-羟基戊酸与粪便硬度评分（r=-0.22，P=0.048）和腹泻症状严重程度评分（r=-0.23，P=0.039）显著负相关。

干预28天后，与安慰剂组相比，P9组中检测到更多的乙酸和丁酸（P<0.05），但异戊酸、戊酸、丙酸和异丁酸的粪便水平在两组之间没有显著差异（P>0.05）。此外，与安慰剂组相比，P9干预显著降低了粪便中脱氧胆酸的水平（P<0.05），而胆酸和鹅脱氧胆酸在两组之间没有显著差异（P>0.05）。这些结果证实，P9干预可以增加患者功能性肠道代谢物，如乙酸和丁酸，同时降低脱氧胆酸的水平。总之，这项研究为益生菌P9对慢性腹泻的适度缓解作用提供了证据。观察到的症状改善伴随着特定肠道细菌、噬菌体和代谢物的调节，在减少炎症和增强肠道屏障功能方面发挥了作用。

参考文献：Yang, N., Ma, T., Xie, Y. et al. Lactiplantibacillus plantarum P9 for chronic diarrhea in young adults: a large double-blind, randomized, placebo-controlled trial. Nat Commun 15, 6823 (2024). https://doi.org/10.1038/s41467-024-51094-2