羧甲基壳聚糖 - 原花青素纳米颗粒包裹益生菌，消化过程中精准抑制晚期糖基化终产物

饮食来源的晚期糖基化终产物（AGEs）在体内积累会引发衰老、糖尿病、阿尔茨海默病等慢性疾病，现有 AGEs 抑制剂多存在毒副作用且无 FDA 批准药物；天然产物因安全性成为研发方向，多酚具强抗氧化、抗糖基化能力，益生菌可调节肠道菌群、维护肠屏障，但多酚在消化过程中易降解，益生菌易被胃酸、消化酶破坏，且传统包封策略仅侧重提升益生菌存活率，未兼顾包封材料的生物活性。

01 L.f@CMC-LSOPC NPs 表征结果

采用复凝聚法制备纳米颗粒，通过平板计数法、DMAC 法分别检测发酵乳杆菌包封率、LSOPC 载药率 / 载药量，利用纳米粒径电位仪、透射电镜（TEM）、红外光谱（FTIR）分析粒径、电位、微观结构及结合方式，同时开展热抗性实验。其结果为发酵乳杆菌包封率为50%，LSOPC 载药率31.786±0.027%、0.047±0.004 mg/mg，热抗性提升幅度与游离菌对比提升28%，胃阶段存活率与游离菌对比提升30.3%，肠阶段释放率为82.7%。

02 体外消化实验核心结果

游离发酵乳杆菌在胃阶段因酸性环境活性显著降低，而 L.f@CMC-LSOPC NPs 形成的外壳为益生菌提供保护，使其胃阶段存活率提升 30.3%；肠阶段包封体系解体，益生菌逐步释放，2h 释放率达 82.7%。且L.f@CMC-LSOPC NPs 对 G-CS 水解释放 AGEs 的抑制效果显著优于 LSOPC、CMC-LSOPC NPs、游离发酵乳杆菌单一成分，消化 4h 时抑制效果最显著；各实验组均能抑制 G-CS 水解，其中 L.f@CMC-LSOPC NPs 的抑制效果最强，胃阶段 G-CS 水解度低，肠阶段水解度最高但仍显著低于空白组。

03 抑制机制

通过扫描电镜（SEM）观察与消化酶、G-CS 的微观作用结构，利用 UPLC-Q-Exactive/MS 分析 LSOPC 在发酵乳杆菌作用下的成分变化，通过 DPPH、ABTS+、羟自由基清除实验检测抗氧化能力。结果显示：在胃里L.f@CMC-LSOPC NPs 与 G-CS 形成紧密结构，物理性抑制 G-CS 与胃蛋白酶的接触，从而抑制 G-CS 水解，减少 AGEs 的初步释放。

在肠里包封体系解体，释放的成分与胰蛋白酶相互作用，显著降低胰蛋白酶活性，进一步抑制 G-CS 水解；发酵乳杆菌通过水解、去甲基化、去羟基化作用将 LSOPC 降解为没食子酸、对羟基苯乙酸、对香豆酸、对羟基苯丙酸 4 种小分子酚酸，这类酚酸分子更小、生物活性更强；小分子酚酸与益生菌协同提升肠道消化液的 DPPH、ABTS+、羟自由基清除能力，增强抗氧化性，通过清除羰基化合物、抵抗氧化应激减少 AGEs 形成。SEM 显示，胃阶段 L.f@CMC-LSOPC NPs 与 G-CS、胃蛋白酶形成紧密结构，肠阶段则呈现分散结构，利于成分释放与作用发挥。

文献链接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0141813025103401?via=ihub