什么是假病毒？假病毒的分类

  假病毒是一种人工构建的重组病毒，其不具有完整基因组，包膜蛋白或衣壳蛋白序列被删除或者被修饰，因此假病毒没有自主复制能力，可以感染宿主细胞，但只能在细胞内复制一次。目前被广泛应用于核酸检测标准品、病毒感染机制、抗病毒药物等研究。

  假病毒具有可操作性强、生物风险低、检测方便等特点，被广泛应用于高风险和高致病性病毒的研究，如SARS、MERS、埃博拉病毒、流感病毒等。尤其有助于在二级生物安全实验室(BSL-2)研究需要三级生物安全实验室(BSL-3)或更高安全级别实验室的病毒研究。下面以SARS-CoV-2为例简单介绍假病毒的分类。

  SARS-CoV-2假病毒种类

  SARS-CoV-2活病毒的研究仅限于BSL-3，这使得全球大多数研究实验室无法进行SARS-CoV-2研究，这将严重延缓SARS-CoV-2的疫苗和药物的研发。目前SARS-CoV-2假病毒系统主要有四类。

  1.人类免疫缺陷病毒(HIV-1)的慢病毒包装系统，它是目前应用最广泛的SARS-CoV-2假病毒包装系统。通常，将两个或三个质粒共转染到细胞中产生假病毒，通过收集培养基上清或者裂解细胞等方法获得。双质粒包装系统是应用最广泛的SARS-CoV-2假病毒包装系统。

  2.小鼠白血病病毒(MLV)假病毒系统，MLV是典型的逆转录病毒，含有携带三个基因分别编码病毒衣壳蛋白、病毒酶和包膜蛋白。研究人员曾使用MLV假病毒系统评估SARS-CoV-2 S蛋白介导病毒进入靶细胞的因素。

  3.水泡性口炎病毒(VSV)假病毒系统，VSV是一种负链RNA病毒，具有介导其进入的单一类型包膜糖蛋白。糖蛋白缺失的VSV可以与异源病毒包膜糖蛋白的顺式元件来组装VSV假病毒。

  4.噬菌体MS2包装系统，可将SARS-CoV-2的包膜(E)、核衣壳(N)或ORF1ab基因插入MS2载体。但MS2对于所插入的序列的大小具有限制性，当长度超过500bp时，其包装效率就会显著降低，由于这一限制，需要将N、E、ORF1ab基因的九个部分分别插入到MS2载体中，再将不同片段的MS2假病毒混合应用。

  参考文献：

  1. Chen, M., Zhang, X. E. Construction and applications of SARS-CoV-2 pseudoviruses: a mini review. International journal of biological sciences, 2021, 17(6), 1574–1580.

  2. Xiang, Q., Li, L., Wu, J., Tian, M., Fu, Y. Application of pseudovirus system in the development of vaccine, antiviral-drugs, and neutralizing antibodies. Microbiological research, 2022, 258, 126993.