研究背景

碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌（CRPA）属于高风险多重耐药条件致病菌，广泛存在于水环境介质中，可经地表径流、污水排放持续扩散传播，具备较强环境适应性与水平耐药基因转移能力，对公共卫生与水生态安全构成严重威胁。目前水环境CRPA 精准筛查与定量检测体系尚未统一，不同检测技术在灵敏度、特异性、检测时效及实际水样适用性方面存在明显差异，缺乏针对地表水与复合污水基质下CRPA检测方法的系统性对比与效能评估，难以支撑水环境耐药菌常态化监测与风险管控。

主要结果

不同检测方法对复杂水环境基质的适配性差异显著，传统选择性培养法操作简便、成本低廉，可实现CRPA活菌分离与后续药敏表型分析，但检出灵敏度低、耗时较长，易受杂菌与背景微生物干扰。

分子生物学检测技术靶向识别菌种与耐药标记基因，检测速度快、灵敏度与特异性更高，适合大批量水样快速筛查；其中qPCR可实现目标菌与耐药基因绝对定量，宏基因组技术能够无偏解析环境中CRPA丰度、耐药谱及潜在宿主关联，但仪器与检测成本更高，对实验条件与数据分析能力要求严苛。

水样浊度、有机质、残留消毒剂等基质杂质会显著抑制核酸扩增效率，降低分子法检出效果，经过过滤浓缩与杂质去除的前处理手段，可有效提升复杂污水中CRPA 的阳性检出率与检测稳定性。

图1.全文概要图

此外，本试剂盒基于环介导的恒温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP），用于水体中铜绿假单胞菌的快速检测，可借助显色指示剂直接判读结果。

图2.环凯检测试剂示例

研究结论

水环境中CRPA的检测需结合水样类型、监测目的与应用场景选择适配技术：培养法适用于活菌分离与表型耐药验证，分子定量技术适合快速预警与污染负荷定量，宏基因组学可用于大范围耐药组特征解析。水样前处理优化是提升污水及复杂地表水 CRPA检测准确性的关键，该研究明确了各类检测技术的优劣与适用边界，为水环境碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌标准化监测、风险溯源及防控策略制定提供技术参考。

论文链接：https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2024.178086.