诺如病毒是全球急性胃肠炎的主要病原体，其丰富的遗传多样性给疫苗的研发带来巨大挑战。据统计，诺如病毒每年在全球造成超过6.85亿例急性胃肠炎，其中20万人死亡，医疗和社会经济负担巨大。一项近期发表在病毒学顶刊《Journal of Virology》上的研究，利用单细胞测序技术，首次系统性地从健康人体内分离并鉴定出能够广谱抗多种诺如病毒基因型的单克隆抗体。为开发具有广泛保护力的新型疫苗和治疗性抗体带来了希望。

诺如病毒属于单链正链RNA病毒。根据衣壳蛋白基因（ORF2）的序列差异，诺如病毒被分为10个基因群（GI-GX），每个基因群又包含多种基因型。诺如病毒的衣壳蛋白基因频繁发生遗传变异和抗原漂移，尤其是GII.4基因型，在过去几十年中占据主导地位，并不断演变出新的变种，使得病毒能够逃避宿主免疫识别。这种持续的进化，使得疫苗设计和治疗药物开发困难重重。

为了系统性地解析健康人群中针对诺如病毒的B细胞应答，研究团队采用了创新性的高通量单细胞测序技术——LIBRA-seq（Linking B Cell Receptor to Antigen Specificity through Sequencing）。该技术能够将单个B细胞的B细胞受体（BCR）序列与其结合的抗原特异性进行精确关联，从而实现对大量B细胞抗体库的快速筛选和精确定位。

研究主要发现：

1.在8次LIBRA-seq筛选实验中，研究人员从健康捐献者身上成功鉴定了大量诺如病毒特异性B细胞。数据显示，LIBRA-seq预测的抗体结合能力与后续ELISA实验结果具有高度一致性，验证了该技术在大规模识别抗原特异性和交叉反应性B细胞方面的可靠性。

图1 LIBRA-seq 技术鉴定诺如病毒抗体（引自参考文献）

2. 25种诺如病毒特异性单克隆抗体（mAb）表现出显著异质性的结合模式。其中8种mAb表现出最广泛的反应性，能够结合所有测试的GII.4、GII.17、GII.22、GII.23、GII.26、GII.27基因型P结构域。4种mAb能够结合五种基因型，1种mAb结合三种基因型，1种mAb结合两种基因型。3种mAb则具有特异性，仅能够结合单一基因型。

3.表位竞争性ELISA揭示，广谱反应性抗体靶向诺如病毒P结构域上至少三个主要表位类别。其中一些抗体显示出重叠或空间邻近的结合位点，表面其靶向一个可能更具保守性的关键表位。这种表位识别的多样性表明，抗体广谱性并非局限于单一保守区域。

4．HBGA阻断试验结果显示，抗体阻断HBGA的效力在不同mAb和基因型之间差异显著。研究结果揭示了HBGA阻断敏感性存在基因型依赖性差异。同时也显示出跨基因型的HBGA阻断能力，这表明它们可能靶向P结构域上保守的功能性表位。

研究结果表明，健康人体内存在一个多样化的B细胞库，能够产生广谱或基因型特异性的识别诺如病毒的抗体。通过研究健康捐献者，而非近期感染或接种疫苗的个体，可以反映个体一生中累计暴露于诺如病毒后所获得的免疫应答。然而尽管健康人体内存在能够中和病毒的广谱抗体，但人们仍会反复感染诺如病毒。这可能由于这些广谱抗体的丰度、持久性和功能效力可能不足以提供长期、全面的保护。此外，诺如病毒的持续抗原漂移和基因重组，也可能使其能够有效逃避免疫识别。

参考文献：

Leonard SEW, Powers OC, Amlashi P, von Itzstein M, Wasdin PT, Marinov TM, Abu-Shmais AA, Georgiev IS, Hansman GS. Norovirus-specific monoclonal antibodies that block histo-blood group antigen binding isolated from healthy donors. J Virol. 2026, 26:e0049726.