用生化方法鉴定牛肉中的单核细胞增多性李斯特菌及溶血素基因扩增
背景:在巴西和世界其他国家,已经进行了研究,以确定牛肉中的单核细胞增多性李斯特菌,这些牛肉最好在未煮熟的情况下食用,并且在不符合严格的植物检疫要求的情况下上市时,可能会导致李斯特菌病的爆发。在这种食源性疫情中,用于检测病原体的方法及其相关效率对于正确评估至关重要。
方法:使用生物化学和分子技术鉴定了从30份新鲜牛肉样本中分离出的单核细胞增多性乳杆菌。
结果:生化测试(过氧化氢酶、活力、β-溶血和碳水化合物发酵)以及hly基因(溶血素的产生是李斯特菌病发病机制的重要因素)的PCR分析结果显示,50%的肉店展示的牛肉被细菌污染并证实54.16%的分析肉类样本对单核细胞增多性李斯特菌呈阳性。这项研究强调了在自由市场中进行微生物监测的重要性,以尽量减少消费者接触这种食源性病原体。
使用传统方法鉴定单核细胞增多性李斯特菌的主要问题之一是所涉及的时间,因为与分子方法相比,传统的微生物分析可能需要长达14天才能完成,并且需要更高数量和质量的样品。相比之下,与经典(生物化学)方法相比,分子方法具有优势,原因有两个:i)与传统方法相比,PCR方法准确且成本较低,传统方法通常是限制因素,因为它们需要细菌富集和培养基以及有利的生长条件(温度、pH、光度);ii)PCR方法更快、更具可重复性。
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