在李斯特菌琼脂上产生β-D-葡糖苷酶阳性表型的细菌分离株

  Ottaviani和Agosti的琼脂李斯特菌(ALOA)是根据国际标准化组织(ISO)的官方方法检测和计数食品中单核细胞增多性李斯特菌的强制性培养基。在ALOA上，李斯特菌由于产生β-D-葡萄糖苷酶而呈现蓝绿色菌落。β-D-葡糖苷酶是一种切割5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-吡喃葡糖苷的酶，这是一种包含在培养基配方中的显色底物。目前的工作报告了即食软奶酪中的细菌分离株，它们能够在ALOA上生长，形成蓝绿色菌落，因此在表型上类似李斯特菌。所有分离株也能够在选择性培养基PALCAM和RAPID L'mono上生长，通过生物化学测试对分离株进行了表征，包括ISO标准中规定的李斯特菌确认测试。并通过对其16S rRNA基因的部分测序进行了鉴定。根据测序结果，分离物代表了12种不同的细菌或种群，属于7个不同属，其中包括从未从食物中分离出过的纤维素酰亚胺菌属。结果显著扩展了以前已知能够在ALOA上生长为蓝绿色菌落的细菌列表，并表明培养基对非李斯特菌(食品中存在的革兰氏阳性细菌)的抑制特性可能还有进一步改进的空间。

  在ISO标准中，Ottaviani和Agosti(ALOA)，是计数和检测单核细胞增多性李斯特菌的强制性选择性培养基。ALOA在分离单核细胞增多李斯特菌方面比其他选择性培养基具有优势，因为它允许致病性李斯特菌与其他李斯特菌同时分化。其他李斯特菌通常是从单核细胞增多性李斯特菌阳性的食物样本中共同分离出来的。因此，RTE食品中存在非致病性李斯特菌可以表明食品或食品加工环境中存在致病性李斯特杆菌，因为大多数李斯特菌具有相似的生态位。因此，除了李斯特菌外，还需要在RTE食品或环境样本中检测其他李斯特菌的可靠方法

  选择性和差异显色固体培养基，已被开发用于分化产生磷脂酶C的李斯特菌。基于李斯特菌ISO协议中规定的确认测试。

  尽管ALOA在食品中检测和计数单核细胞增多性李斯特菌方面的开发和使用在世界各地的食品微生物学家手中提供了无可争议的优势，但本研究的结果表明，该培养基对李斯特菌属的特异性可能还有进一步提高的空间。未来的研究可能应该集中在配方调整上，以消除或至少进一步减少食品中存在的非李斯特菌、β-D-葡萄糖苷酶阳性、革兰氏阳性细菌。此外，可能需要在修订后的ISO方法中纳入对李斯特菌属的进一步确认测试;使用相差显微镜和新鲜的湿悬标本对ALOA上产生蓝绿色菌落的分离株进行强制性检查，将有助于消除许多非李斯特菌。