传染性人类诺如病毒在河口水中的持续存在

诺如病毒是全球胃肠炎主要病原之一，每年造成约42亿美元的社会损失。诺如病毒主要通过人传人接触传播，但食源性和水源性传播也是十分重要的传播途径，每年约18%的食源性疾病与诺如病毒有关。其中贝类在水中污染对人类健康造成了严重的威胁。了解传染性病毒在水环境中的持续传染性成为了化解贝类食品的污水污染风险的关键要点。Daniel Rexin等人在《Persistence of Infectious Human Norovirus in Estuarine Water》一文中通过采用人肠道类肠（HIE）培养诺如病毒，检测病毒分别在4°C和16°C的模拟河水中培育21天下的传染性。

实验步骤如图1所示。将患者粪便样本进行病毒提取并进行浓缩，用实验室模拟的河水稀释到一定浓度在4°C和16°C中分别培育0、1、4、8、13和21天。设置三个平行。然后浓缩，从浓缩中提取RNA直接测定个时间点的浓度，同时将病毒悬液接入含有HIE细胞的培养基中，在37°C下孵育72h。后破碎细胞，提取RNA采用ddRT-PCR进行定量测定。与基线样本相比，诺如病毒滴度增加则认为具有传染性。

数据处理：相对传染性（I_t）表示为10次重复感染下的感染样本所占比。对数据分布进行检验，对最佳回归模型进行模拟。使用以下公式推测衰减常数k。

结果如下图所示：

RT-ddPCR对诺如病毒RNA的直接定量显示，在实验期间，样品中诺如病毒水平随时间(方差分析，P值= 0.158，α = 0.05)和温度(方差分析，P值= 0.221，α = 0.05)无显著差异(图2上)。在整个实验过程中，直到第21天(图2下)，都检测到感染性诺如病毒。相对传染性从开始时的100%下降到第21天的3%。当对数据应用指数回归时，确定了4°C时的传染性衰减率常数k为0.07天⁻¹(95% CI: 0.04-0.10天⁻¹)，16°C时的传染性衰减率常数k为0.17天⁻¹ (95% CI: 0.12-0.22天⁻¹)。额外的平方和f检验导致衰减率之间存在显著差异(P值= 0.0061，α = 0.05)。

本文，应用HIE细胞培养来解决诺如病毒在河口水中持续感染的知识空白。研究结果表明，感染性诺如病毒在4°C和16°C的实验室条件下，在25 ppt的人工河口水中持续存在至少21天。为未来的持久性和迁移研究提供了相关数据，并有助于改进污水或溢流对贝类及其生长水域的环境传输的定量风险模型。

参考文献：Rexin, D., Rachmadi, A.T. & Hewitt, J. Persistence of Infectious Human Norovirus in Estuarine Water. Food Environ Virol 16, 58–64 (2024). https://doi.org/10.1007/s12560-023-09577-w