用于金黄色葡萄球菌即时检测的完全集成注射器系统

食品安全，特别是控制食源性病原体感染，对世界上80亿人的生命和健康非常重要。食用被金黄色葡萄球菌污染的食物可导致菌血症、肺炎甚至死亡。PCR作为筛查的金标准，体现了核酸方法在病原体诊断中的准确性和重要性。

因此，几种可视化的等温核酸扩增方法被开发出来，以提供更直观的检测，并作为现场检测的强大替代方案。然而，在等温扩增方法中，如环介导等温扩增（LAMP）容易产生气溶胶污染，从而导致假阳性结果。而且装置外核酸提取的长时间操作也容易造成核酸的降解和丢失，导致灵敏度受损。

在此，作者开发了一种名为完全集成注射器系统(FIIS)的注射器策略，用于金黄色葡萄球菌的即时检测(POCT)。壳聚糖功能化磁珠(CMBs)富集核酸后，进行原位环介导等温扩增(LAMP)反应，检测结果直观。在这项工作中，创新地构建了一个五组分油-水两相体系。矿物油用于分离裂解相、洗涤相和扩增/检测相三个水相。CMBs可以通过外部磁铁的运动在相之间快速无损地穿梭。样品被注射器吸入后，DNA在3 min内被CMBs释放并富集。值得注意的是，FIIS集成了核酸裂解、富集、洗涤、扩增等整个检测步骤，通过简单的人工操作，1 h内即可直观检测金黄色葡萄球菌。

结果显示，完全集成FIIS对人工加标鸡的灵敏度为10³ CFU/g，无需繁琐的样品制备，富集12 h后灵敏度达到1 CFU/g。与培养法相比，真实动物样品的检测结果令人满意，灵敏度为95.24%，特异性为100%。由于FIIS操作简单，不需要外部设备，且读数直观，我们预计FIIS将有助于在资源有限的环境中检测金黄色葡萄球菌和其他食源性病原体。

原文doi：10.1016/j.microc.2024.110335