猴痘病毒及其检测技术介绍
猴痘是一种由猴痘病毒(Mpox virus,MPXV)引起的人兽共患传染病,其临床表现主要为发热、皮疹(图1)、淋巴结肿大,病死率在1%~10%之间。猴痘病毒与天花病毒(VARV)、牛痘病毒(CPV)和痘苗病毒(VACV)同属痘病毒科正痘病毒属。自20世纪80年代在世界范围内根除天花后,猴痘病毒成为人类最关注的正痘病毒。猴痘病毒具有极强的传播性,其传播途径包括但不限于:直接接触感染者的皮肤或黏膜、体液(呼吸道分泌物、病变渗出物、血液)及被病毒污染的物品。自猴痘疫情出现至今,猴痘病毒在国际上已“享有盛誉”;近日,世卫组织(WHO)针对非洲多国猴痘疫情的不断升级,宣布其构成“国际关注的突发公共卫生事件”,这是继两年前后,WHO再次对猴痘疫情发出的最高级别警报。在国内,于2023年9月,猴痘已被纳入乙类传染病管理,其传播给国民的生理和心理都带了巨大的负担。值得关注的是,目前尚未研发出可用的猴痘疫苗。因而,在猴痘疫情的防控工作上,最有效的干预措施仍是对猴痘病毒开展大规模的快筛工作,然后对受感染者进行隔离,避免疫情扩散。因此,针对猴痘病毒发展高特异性的快速检测方案是当前的一大研究热点。
目前,猴痘病毒的检测主要可分为4类:(1)病毒培养和分离鉴定。此方案为确证试验,但对实验环境(生物安全三级)和科研人员要求较高,且病毒分离阳性率低,耗时长;(2)电子显微镜。可用于评估样本中潜在的猴痘病毒,但对技术人员和操作技术及病毒载量的要求都比较高。(3)分子检测技术。事实上,在病毒检测方面,核酸扩增技术常常是标准且快速的有效筛查手段,例如新冠大流行期间,大规模开展的核酸检测。通过设计相应的特异性引物直接靶向目标片段,即可在相关样本(体液或者组织)中实现目标病原的高灵敏度和高特异性地检测。为应对猴痘疫情的全球传播和防控需求,保障国民甚至全球人民生命健康,国内众多实验室和企业都在猴痘检测方面有所布局。目前,相关分子检测技术/试剂盒的开发主要是基于猴痘病毒F3L基因为靶序列进行设计的,如近日达安基因获批上市的“猴痘病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)”。当然,除了金标准“qPCR”,亦有等温方法的推出,例如LAMP,RPA、RPA-CRISPR联用技术等,这些技术在检测时间、检测通量、检测限和更广泛的实际应用价值上都有一定的突破。(4)免疫学技术。如酶联免疫吸附测定(ELISA)及一些基于免疫层析的快速测试条,基于抗原与抗体间的相互作用,完成目标病原的检测。此技术亦具有很强的特异性,不过抗原和抗体间的匹配可能并非一一对应的,这可能导致某些假阴性或假阳性结果。
总体而言,为了阻止猴痘演变为全球性的大流行病,迫切需要开发更多能够快速、准确诊断猴痘病毒的方法并推广应用。分子检测技术作为精准诊断的重要工具,预计将在未来得到更广泛的研究和应用。
1. 参考链接:https://news.un.org/en/story/2024/08/1153176
论文链接:https://www.cell.com/cell-reports-methods/fulltext/S2667-2375(23)00284-9
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